利用斑馬魚模型評價過敏反應【評價原理】
過敏原/致敏因子誘導組織學上肥大細胞脫顆粒，釋放活性介質如組胺、5-HT，前列腺素D、白三烯、血小板活化因子等，表現(xiàn)為平滑肌收縮，毛細血管擴大和通透性增強，腺體分泌物增多等，誘發(fā)多種過敏癥狀。 類胰蛋白酶是肥大細胞內預先合成的中性蛋白酶，是臨床上檢驗人體是否過敏的重要指標。斑馬魚產(chǎn)生過敏反應時，亦誘導肥大細胞分泌類胰蛋白酶。C48/80作為肥大細胞活化劑，可以誘導組織學上肥大細胞脫顆粒，釋放類胰蛋白酶。
我們檢測過敏有兩種方法。1. 類胰蛋白酶的含量：用酶標儀檢測類胰蛋白酶的含量。2. 肥大細胞數(shù)量：制作病理切片，經(jīng)過過碘酸雪夫染色，肥大細胞呈藍色，肥大細胞釋放的組胺和白三烯等物質呈紅色。
利用斑馬魚模型評價過敏反應【實驗方案】
我們將受測試斑馬魚分成四組，分別是正常對照組和滴注致敏劑低、中、高劑量組。其中正常對照組未滴注C48/80，滴注致敏劑組均滴注C48/80低、中、高劑量（C48/80通過溶解到養(yǎng)魚用水中的方式攝入到斑馬魚體內）。
滴注C48/80一段時間后，利用酶標儀檢測類胰蛋白酶含量（吸光度值），同時制作病理切片進行過碘酸雪夫染色。
【結果展示】
圖1. 斑馬魚類胰蛋白酶含量（吸光度值）
與正常對照組比較，*p < 0.05，***p < 0.001
可以看到，滴注中、高濃度致敏劑組類胰蛋白酶含量與正常對照組比較明顯升高。
圖2. 斑馬魚體內肥大細胞染色典型圖
箭頭指示為肥大細胞
從病理切片中也能看出來，滴注致敏劑組斑馬魚的肥大細胞與正常對照組相比數(shù)量明顯上升。
【評價結論】
1.經(jīng)過每組30尾斑馬魚的對比實驗，滴注致敏劑組斑馬魚類胰蛋白酶含量和肥大細胞數(shù)量與正常對照組相比數(shù)量明顯上升。
2.本實驗證實了C48/80具有明顯的致敏作用。
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