利用斑馬魚模型評價皮膚刺激性

利用斑馬魚模型評價皮膚刺激性【評價原理】

與人類相似，中性粒細胞在斑馬魚體內(nèi)發(fā)揮固有免疫作用，且是體內(nèi)數(shù)量多的白細胞在炎癥反應起始階段有一系列事件發(fā)生，如血管舒張、毛細血管網(wǎng)的通透性增強、炎性介導釋放等?；瘖y品對皮膚的刺激表型主要表現(xiàn)為皮膚炎癥，炎癥早期主要表現(xiàn)為毛細血管擴張、通透性亢進和水腫。刺激物進入斑馬魚體內(nèi)，誘導炎癥反應，中性粒細胞發(fā)生免疫應答，向皮膚表皮遷移并聚集。

采用轉(zhuǎn)基因中性粒細胞綠色熒光斑馬魚，可在熒光顯微鏡在觀察到皮膚受刺激的斑馬魚皮膚上的中性粒細胞明顯增多。

利用斑馬魚模型評價皮膚刺激性【實驗方案】

我們將受測試斑馬魚分成兩組，分別是正常對照和供試品組（供試品通過溶解到養(yǎng)魚用水中的方式攝入到斑馬魚體內(nèi)）。

皮膚吸收供試品一段時間后，我們在顯微鏡下觀察斑馬魚皮膚上中性粒細胞數(shù)量（頭部、心臟和血管中的中性粒細胞除外）。

【結(jié)果展示】

圖1. 斑馬魚皮膚刺激性表型圖

綠色光點為中性粒細胞，綠色熒光越多，中性粒細胞越多，皮膚刺激性越強

可以看到，供試品組斑馬魚皮膚上中性粒細胞數(shù)量明顯增加。

【評價結(jié)論】

1.經(jīng)過每組30尾斑馬魚的對比實驗，攝入供試品組的斑馬魚皮膚上中性粒細胞明顯增多，與正常對照組存在明顯的差別。

2.本實驗證實了該十二烷基磺酸鈉（SLS）和甲基異噻唑啉酮對斑馬魚有皮膚刺激性。