利用斑馬魚模型評(píng)價(jià)皮膚光毒性【評(píng)價(jià)原理】
光毒物質(zhì)在特定的波長(zhǎng)光線刺激下,形成單線態(tài)和三線態(tài)后,可迅速與細(xì)胞小分子物質(zhì)結(jié)合形成特異的光激活物質(zhì)。這種物質(zhì)在體內(nèi)會(huì)降解為普通毒物或再次成為光毒物質(zhì),對(duì)機(jī)體造成傷害。在急性光毒性反應(yīng)中,皮膚在照射紫外線后數(shù)分鐘至數(shù)小時(shí)內(nèi)出現(xiàn)紅斑、水皰等。在慢性光毒性中可引起照射處皮膚色素的沉著過(guò)多以及皮膚增厚。斑馬魚皮膚包括表皮、真皮和真皮下組織,結(jié)構(gòu)與人高度相似。因此,斑馬魚適合評(píng)價(jià)化妝品的光毒性。
我們?cè)u(píng)價(jià)斑馬魚光毒性有2個(gè)指標(biāo):1.毒性表型;2.LC50。
利用斑馬魚模型評(píng)價(jià)皮膚光毒性【實(shí)驗(yàn)方案】
我們將受測(cè)試斑馬魚分成12個(gè)組,分別是避光正常對(duì)照組,5個(gè)避光供試品組,光照正常對(duì)照組,5個(gè)光照供試品組。供試品通過(guò)溶解到養(yǎng)魚用水中攝入到斑馬魚體內(nèi)。
皮膚吸收一段時(shí)間供試品后,我們記錄斑馬魚各組斑馬魚死亡率,以軟件計(jì)算供試品LC50;并記錄拍照記錄明顯毒性表型。
【結(jié)果展示】
圖1:光毒性表型圖
可以看到,正常對(duì)照組和光照處理正常對(duì)照組未誘發(fā)任何毒性表型。供試品組誘發(fā)卵黃囊吸收延遲,光照處理的供試品組誘發(fā)心血管毒性和腎毒性等。
圖2. 供試品LC50
可以看到,未光照的供試品與光照過(guò)的供試品LC50有明顯差異。
【評(píng)價(jià)結(jié)論】
1.經(jīng)過(guò)每組30尾斑馬魚的對(duì)比實(shí)驗(yàn),光照過(guò)的供試品誘發(fā)毒性表型較未光照的供試品嚴(yán)重,且與正常對(duì)照組存在明顯的差別;未光照的供試品與光照過(guò)的供試品LC50有明顯差異。
2.本實(shí)驗(yàn)證實(shí)了供試品具有光毒性。