利用斑馬魚(yú)模型實(shí)驗(yàn)檢測(cè)類雌激素物質(zhì)【評(píng)價(jià)原理】
OECD近年大力推崇的“有害結(jié)局路徑”(Adverse Outcome Pathway,AOP)毒性評(píng)估策略來(lái)測(cè)試類雌激素這一大類有害物質(zhì)。本方法參照糧農(nóng)組織和世界衛(wèi)生組織(FAO/WHO,2000)關(guān)于雌激素物質(zhì)日攝取量來(lái)評(píng)估測(cè)試物的安全性,通過(guò)轉(zhuǎn)基因標(biāo)記技術(shù)表達(dá)的綠色熒光蛋白含量來(lái)量化類雌激素物質(zhì)含量,綠色熒光蛋白特異性地在肝臟表達(dá),一旦供試品中含一定量的類雌激素化學(xué)物質(zhì),雌激素轉(zhuǎn)基因斑馬魚(yú)暴露后肝臟部位會(huì)出現(xiàn)綠色熒光,可用綠色熒光量化供試品中的類雌激素物質(zhì)含量,從而達(dá)到檢測(cè)效果。
利用斑馬魚(yú)模型實(shí)驗(yàn)檢測(cè)類雌激素物質(zhì)【實(shí)驗(yàn)方案】
我們將受測(cè)試斑馬魚(yú)分成兩組,分別是正常對(duì)照和供試品組(供試品通過(guò)溶解到養(yǎng)魚(yú)用水或注射的方式攝入到斑馬魚(yú)體內(nèi))。
攝入供試品一段時(shí)間后,我們?cè)跓晒怙@微鏡下觀察斑馬魚(yú)肝臟熒光。
【結(jié)果展示】
圖1.含類雌激素物質(zhì)的供試品處理后斑馬魚(yú)熒光表型圖
黃色曲線部位為肝臟,綠色熒光量化類雌激素含量
可以看到,攝入供試品組肝臟部位有明顯的綠色熒光。
【評(píng)價(jià)結(jié)論】
1.經(jīng)過(guò)每組30尾斑馬魚(yú)的對(duì)比實(shí)驗(yàn),攝入含類雌激素物質(zhì)的供試品組斑馬魚(yú)肝臟熒光明顯,與正常對(duì)照組存在明顯差別。
2.本實(shí)驗(yàn)證實(shí)了該供試品含有類雌激素物質(zhì)。