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免疫印跡技術(shù)服務(wù)(western blot)

參考價面議
具體成交價以合同協(xié)議為準(zhǔn)
  • 公司名稱上海閃晶分子生物科技有限公司
  • 品       牌
  • 型       號
  • 所  在  地上海市
  • 廠商性質(zhì)經(jīng)銷商
  • 更新時間2017/7/12 12:47:20
  • 訪問次數(shù)657
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免疫印跡技術(shù)服務(wù)

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 上海閃晶分子生物科技有限公司,座落在漕河徑開發(fā)區(qū)(原址:上海生物工程研究院),是專業(yè)從事生物技術(shù)服務(wù)的公司;公司擁有一批度較高的學(xué)科帶頭人和一支訓(xùn)練有素、多學(xué)科配合、以中青年科技人員為主的研究隊(duì)伍。公司自研究所改制以來在分子生物學(xué)試劑盒、熒光定量PCR、siRNA載體構(gòu)建、全基因合成拼接、熒光探針修飾、多肽合成、dNTP、Pfu酶、熱啟動Taq酶、DNA marker、基因工程、原生質(zhì)體的培養(yǎng)、細(xì)胞融合、單克隆抗體診斷試劑等研究方向作了深入的研究;

閃晶生物地理位置圖,點(diǎn)擊放大!

   公司擁有從事基因工程、細(xì)胞工程、單克隆抗體研究的現(xiàn)代化實(shí)驗(yàn)室和*的精密設(shè)備,如:實(shí)時PCR 擴(kuò)增儀、多肽合成儀、 DNA 合成儀、 DNA 序列分析儀、 FPLC 、高壓液相色譜儀、凍干機(jī)、 CO2 培養(yǎng)箱、大型搖床等。

   上海閃晶生物自2004年成立以來,一直致力于“如何將科研技術(shù)轉(zhuǎn)化成生產(chǎn)力”的工作,可喜的是閃晶公司在短短的幾年內(nèi)已經(jīng)成功地完善了一系列的服務(wù)項(xiàng)目和試劑盒;公司始終堅持自己的理念:專業(yè)公司,打造專業(yè)服務(wù)。如果你有新的技術(shù)、新的項(xiàng)目或產(chǎn)品,需要合作轉(zhuǎn)化,請與我們聯(lián)系。

 

 

熒光定量PCR,基因合成,多肽合成等等
免疫印跡(immunoblotting)又稱蛋白質(zhì)印跡(western blot),它是根據(jù)抗原抗體的特異性結(jié)合檢測復(fù)雜樣品中的某種蛋白的方法。western blot是在凝膠電泳和固相免疫測定技術(shù)基礎(chǔ)上發(fā)展起來的一種新的免疫生化技術(shù)。由于免疫印跡(western blot)具有SDS-PAGE的高分辨力和固相免疫測定的高特異性和敏感性,現(xiàn)已成為蛋白分析的一種常規(guī)技術(shù)。免疫印跡(western b
免疫印跡技術(shù)服務(wù)(western blot) 產(chǎn)品信息

閃晶生物為您提供全套免疫印跡(western blot)技術(shù)服務(wù)和相關(guān)的試劑耗材。主要實(shí)驗(yàn)步驟如下:

  • 蛋白質(zhì)抽提

    • 實(shí)驗(yàn)對象為組織樣品,取適量(250~500mg)新鮮組織樣品或正確保存的組織樣品,加1ml含蛋白酶抑制劑的總蛋白抽提試劑(或核蛋白抽提試劑),勻漿后抽提總蛋白(或核蛋白)。

    • 實(shí)驗(yàn)對象為細(xì)胞樣品(細(xì)胞培養(yǎng)),每份樣品取1×106~1×107細(xì)胞,PBS清洗細(xì)胞,去PBS加0.1ml~1ml含蛋白酶抑制劑的總蛋白抽提試劑(或核蛋白抽提試劑)抽提總蛋白(或核蛋白)。

2. 蛋白質(zhì)定量:按BCA蛋白質(zhì)定量試劑盒操作說明操作,測定樣品濃度。 
3. 變性聚丙烯酰胺不連續(xù)凝膠電泳(SDS-PAGE):將準(zhǔn)備好的樣品液和預(yù)染蛋白marker分別上樣,標(biāo)準(zhǔn)加進(jìn)*個孔中,電泳分離蛋白。 
4. 蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)移到PVDF膜,按Bio-Rad蛋白轉(zhuǎn)移裝置說明組裝濾紙凝膠纖維素夾層,30mA恒流條件下,4°C轉(zhuǎn)移過夜。 
5. western blot膜的封閉和抗體孵育

  • 膜在5%脫脂奶粉溶液中室溫孵育1小時以封閉膜上的非特異結(jié)合。

  • 封閉過的膜加入一抗室溫孵育1.5小時,抗原抗體結(jié)合。

  • 加入HRP標(biāo)記的二抗體以結(jié)合一抗,室溫孵育膜1小時。加入HRP標(biāo)記的GAPDH抗體可同時檢測GAPDH含量。

6. western blot結(jié)果檢測:化學(xué)發(fā)光法檢測,膜與化學(xué)發(fā)光底物孵育,經(jīng)X膠片曝光顯影。圖片掃描保存為電腦文件,并用GIS1000分析軟件將圖片上每個特異條帶灰度值的數(shù)字化。 
7. western blot數(shù)據(jù)分析:目的蛋白的灰度值除以內(nèi)參GAPDF的灰度值以校正誤差,所得結(jié)果代表某樣品的目的蛋白相對含量。
8. 提供實(shí)驗(yàn)報告,包括詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方法及免疫印跡實(shí)驗(yàn)結(jié)果的相關(guān)數(shù)據(jù)。
更詳細(xì)的操作說明 
 Western Blot操作規(guī)程

western blot費(fèi)用:每張膜上做一種目的蛋白和相應(yīng)的內(nèi)參蛋白。每張膜上可以做8個樣品。每張膜的費(fèi)用是:1500.00元。一抗另計,其它試劑免費(fèi),一抗訂購時間約為3周。乘車路線:火車站坐1號地鐵到終點(diǎn)站,然后換5號地鐵坐到北橋站即可。
時間:約2-3周。
:master@shinegene.org.cn shinegene@vip.163.com :-11
熒光定量PCR

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