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siRNA/shRNA質(zhì)粒載體構(gòu)建技術(shù)服務(wù)

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公司名稱上海閃晶分子生物科技有限公司
品牌
型號(hào)
所在地上海市
廠商性質(zhì)經(jīng)銷商
更新時(shí)間2017/7/12 12:46:50
訪問次數(shù)636

產(chǎn)品標(biāo)簽:

siRNA/shRNA

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公司介紹主營(yíng)產(chǎn)品

上海閃晶分子生物科技有限公司，座落在漕河徑開發(fā)區(qū)(原址：上海生物工程研究院），是專業(yè)從事生物技術(shù)服務(wù)的公司；公司擁有一批度較高的學(xué)科帶頭人和一支訓(xùn)練有素、多學(xué)科配合、以中青年科技人員為主的研究隊(duì)伍。公司自研究所改制以來(lái)在分子生物學(xué)試劑盒、熒光定量PCR、siRNA載體構(gòu)建、全基因合成拼接、熒光探針修飾、多肽合成、dNTP、Pfu酶、熱啟動(dòng)Taq酶、DNA marker、基因工程、原生質(zhì)體的培養(yǎng)、細(xì)胞融合、單克隆抗體診斷試劑等研究方向作了深入的研究；	閃晶生物地理位置圖,點(diǎn)擊放大!
公司擁有從事基因工程、細(xì)胞工程、單克隆抗體研究的現(xiàn)代化實(shí)驗(yàn)室和*的精密設(shè)備，如：實(shí)時(shí)PCR 擴(kuò)增儀、多肽合成儀、 DNA 合成儀、 DNA 序列分析儀、 FPLC 、高壓液相色譜儀、凍干機(jī)、 CO2 培養(yǎng)箱、大型搖床等。
上海閃晶生物自2004年成立以來(lái)，一直致力于“如何將科研技術(shù)轉(zhuǎn)化成生產(chǎn)力”的工作，可喜的是閃晶公司在短短的幾年內(nèi)已經(jīng)成功地完善了一系列的服務(wù)項(xiàng)目和試劑盒；公司始終堅(jiān)持自己的理念：“專業(yè)公司，打造專業(yè)服務(wù)”。如果你有新的技術(shù)、新的項(xiàng)目或產(chǎn)品，需要合作轉(zhuǎn)化，請(qǐng)與我們聯(lián)系。

展開顯示更多內(nèi)容

熒光定量PCR，基因合成，多肽合成等等

產(chǎn)品簡(jiǎn)介在線詢價(jià)

RNAi （RNAinterference, RNA干擾）技術(shù)，即將與內(nèi)源 mRNA 編碼區(qū)同源的小片段（19 －23bp）外源雙鏈 RNA（double s`tranded RNA ）導(dǎo)入細(xì)胞中，通過(guò)一系列細(xì)胞內(nèi)反應(yīng)引發(fā)細(xì)胞中相應(yīng) mRNA 的降解，從而導(dǎo)致特定基因表達(dá)沉默的一種技術(shù)。RNAi的作用提供了一種經(jīng)濟(jì)、快捷、高效的抑制特異基因表達(dá)的技術(shù)手段，有助于研究該基因在生物模型系統(tǒng)中的作用

siRNA/shRNA質(zhì)粒載體構(gòu)建技術(shù)服務(wù) 產(chǎn)品信息

，是研究基因功能的重要工具，并且逐步成為病毒性疾病、遺傳性疾病以及腫瘤等的基因治療研究的一種手段。

基本原理示意圖

siRNA/shRNA構(gòu)建技術(shù)服務(wù)

本公司提供siRNA 載體的構(gòu)建服務(wù)，siRNA 載體可以在細(xì)胞內(nèi)直接轉(zhuǎn)錄出shRNA ，其干擾效果等同于siRNA ，而且能夠解決 siRNA干擾時(shí)間短的缺點(diǎn)。您只需提供需干擾基因的詳細(xì)信息，包括基因的 mRNA 序列，Genbank Accession No. 和所屬物種，本公司負(fù)責(zé)設(shè)計(jì)3條針對(duì)目的mRNA的siRNA 靶序列，在短時(shí)間內(nèi)構(gòu)建三個(gè)可用于目的mRNA干擾實(shí)驗(yàn)的siRNA 載體。可以為您節(jié)省大量的時(shí)間與精力。此方法是多種siRNA制備方法中*可以進(jìn)行*基因沉默研究的方法。

閃晶生物siRNA載體構(gòu)建服務(wù)程序：
1. siRNA表達(dá)載體的選用：
本公司選用的siRNA 表達(dá)載體含新霉素抗性基因和GFP綠色螢光標(biāo)記，可以建立穩(wěn)定表達(dá)系，同時(shí)可以實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)載體在細(xì)胞中的轉(zhuǎn)染效率。載體中還含有Amp抗性基因，可以無(wú)限擴(kuò)增。
2. 設(shè)計(jì)siRNA靶序列
A 、根據(jù)目的mRNA序列，設(shè)計(jì)3條RNA干擾靶序列，靶序列一般為19 － 21nt 長(zhǎng)。
B 、對(duì)于每條選定的siRNA 靶序列，設(shè)計(jì) siRNA 正義鏈和反義鏈，以 loop(9nt) 相連，稱為 shRNA（short hairpin RNA）。
C、陰性對(duì)照的設(shè)立.
3. 合成模板：
合成每條編碼 shRNA的DNA 模板的兩條單鏈，退火 DNA 單鏈得到 shRNA 的 DNA 雙鏈模板。模板鏈后面接有RNA PolyIII聚合酶轉(zhuǎn)錄中止位點(diǎn)，同時(shí)兩端分別設(shè)計(jì) BamHI 和 HindIII 酶切位點(diǎn)，可以克隆到 siRNA 載體多克隆位點(diǎn)的 BamHI 和 HindIII 酶切位點(diǎn)之間。
4. siRNA 空載體用BamHI和HindIII雙酶切后，1 ％瓊脂糖凝膠電泳，回收線性載體。
5. 連接與轉(zhuǎn)化：
把退火的DNA模板雙鏈連接到線性載體中。采用T4連接酶，插入片斷與載體的摩爾比約為 3 ： 1 。連接產(chǎn)物轉(zhuǎn)化DH5α大腸桿菌，在LB Amp培養(yǎng)基上涂板，37 ℃培養(yǎng)過(guò)夜。
6. PCR 鑒定
7. 測(cè)序鑒定
8.柱抽提陽(yáng)性克隆載體并定量。

收費(fèi)標(biāo)準(zhǔn) siRNA載體構(gòu)建訂單下載

個(gè)數(shù)	價(jià)格(￥)	時(shí)間
1-3個(gè)siRNA表達(dá)載體構(gòu)建	1800.00/個(gè)	14個(gè)工作日
4－10個(gè)siRNA表達(dá)載體構(gòu)建	1500.00/個(gè)	20個(gè)工作日
10個(gè)以上	協(xié)商	協(xié)商

閃晶生物同時(shí)提供腺病毒和慢病毒載體的構(gòu)建服務(wù),5000.00元/個(gè).
腺病毒慢病毒構(gòu)建包裝擴(kuò)增純化服務(wù)
：-11 :master@shinegene.org.cn shinegene@vip.163.com 乘車路線：火車站坐1號(hào)地鐵到終點(diǎn),然后換乘5號(hào)線到北橋站即可。