斑馬魚模型評價促進生長發(fā)育功效【評價原理】
由于硬骨魚和人類在骨骼發(fā)育過程中的基因、信號通路有高度同源性,而且與其他的動物模型相比,斑馬魚具有個體小適合高通量化學篩選、幼魚身體透明易于觀察骨骼發(fā)育的特點,所以近年來以斑馬魚為模型的骨骼研究逐漸成為這一領(lǐng)域的熱點。斑馬魚從前向后的脊椎發(fā)育過程是非連續(xù)的,而是分成兩個不同的區(qū)域:前域(包括前3塊椎骨)和后域(包括第4-31塊椎骨)。將斑馬魚脊椎骨鈣化過程分成兩個不同區(qū)域是基于第2和第3椎骨的出現(xiàn)晚于第4椎骨。我們利用斑馬魚骨骼發(fā)育的規(guī)律,攝入生長發(fā)育促進劑的斑馬魚脊椎骨發(fā)育會加快。
脊椎骨染色應(yīng)用與鈣特異性結(jié)合的熒光染料(呈綠色),經(jīng)熒光顯微鏡觀察脊椎骨的數(shù)量。
斑馬魚模型評價促進生長發(fā)育功效【實驗方案】
我們將受測試斑馬魚分成兩組,分別是正常對照組和服用生長發(fā)育促進劑組(維生素、碳酸鈣之類的生長發(fā)育促進劑通過溶解到養(yǎng)魚用水中的方式攝入到斑馬魚體內(nèi))。
服用一段時間生長發(fā)育促進劑后,我們對斑馬魚做骨骼特異性熒光染色,觀察斑馬魚脊椎骨的發(fā)育情況。
【結(jié)果展示】
圖1. 斑馬魚脊椎骨熒光圖
黃色虛線區(qū)域為定量的脊椎骨
可以看到,服用生長發(fā)育促進劑的脊椎骨數(shù)量明顯比正常對照組增多。
【評價結(jié)論】
1.經(jīng)過每組30尾斑馬魚的對比實驗,服用生長發(fā)育促進劑的斑馬魚脊椎骨數(shù)量比正常對照組增多。
2.本實驗證實了維生素、碳酸鈣具有明顯促進生長發(fā)育功效。