利用斑馬魚模型評價調(diào)節(jié)免疫功效—中性粒細(xì)胞
【評價原理】
靜脈注射給予長春瑞濱造模斑馬魚免疫力低下模型。大劑量長春瑞濱骨髓抑制明顯，導(dǎo)致血小板、紅細(xì)胞及白細(xì)胞數(shù)目（中性粒細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、T細(xì)胞等）減少和貧血，終導(dǎo)致免疫力低下人類與斑馬魚在免疫系統(tǒng)的細(xì)胞組成上極為相似，而且斑馬魚是目前所有同時具有特異性免疫和非特異性免疫動物個體中體積小的，適合高通量評價調(diào)節(jié)免疫功效。斑馬魚靜脈注射大劑量長春瑞濱后可造成免疫低下。
采用轉(zhuǎn)基因中性粒細(xì)胞綠色熒光斑馬魚，可在熒光顯微鏡在觀察到免疫力低下的斑馬魚體內(nèi)的中性粒細(xì)胞熒光強(qiáng)度明顯減弱。
【實驗方案】利用斑馬魚模型評價調(diào)節(jié)免疫功效—中性粒細(xì)胞
我們將受測試斑馬魚分成三組，分別是正常對照組、模型對照組和服用免疫調(diào)節(jié)劑組。其中正常對照組未注射長春瑞濱，模型對照組與服用免疫調(diào)節(jié)劑組都注射了等量的長春瑞濱（長春瑞濱通過靜脈注射的方式攝入到斑馬魚體內(nèi)）。服用免疫調(diào)節(jié)劑組在注射長春瑞濱后攝入鹽酸小檗胺等免疫調(diào)節(jié)劑。
服用一段時間免疫調(diào)節(jié)劑后，我們觀察中性粒細(xì)胞熒光強(qiáng)度變化。
【結(jié)果展示】
圖1. 斑馬魚中性粒細(xì)胞表型圖
綠色熒光顆粒代表中性粒細(xì)胞
可以看到，免疫調(diào)節(jié)劑組中性粒細(xì)胞熒光強(qiáng)度與正常對照組相似，沒有出現(xiàn)中性粒細(xì)胞熒光強(qiáng)度明顯減弱的情況。
【評價結(jié)論】
1. 經(jīng)過每組30尾斑馬魚的對比實驗，免疫調(diào)節(jié)劑組中性粒細(xì)胞數(shù)量與正常對照組相似，并未出現(xiàn)模型對照組免疫力低下的情況。
2. 本實驗證實了鹽酸小檗胺具有增強(qiáng)免疫力的功效。
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