利用斑馬魚模型評(píng)價(jià)調(diào)節(jié)免疫功效—巨噬細(xì)胞
【評(píng)價(jià)原理】
靜脈注射給予長春瑞濱造模斑馬魚免疫力低下模型。大劑量長春瑞濱骨髓抑制明顯,導(dǎo)致血小板、紅細(xì)胞及白細(xì)胞數(shù)目(中性粒細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、T細(xì)胞等)減少和貧血,終導(dǎo)致免疫力低下。人類與斑馬魚在免疫系統(tǒng)的細(xì)胞組成上極為相似,而且斑馬魚是目前所有同時(shí)具有特異性免疫和非特異性免疫動(dòng)物個(gè)體中體積小的,適合高通量評(píng)價(jià)調(diào)節(jié)免疫功效。斑馬魚靜脈注射大劑量長春瑞濱后可造成免疫低下。
采用轉(zhuǎn)基因巨噬細(xì)胞綠色熒光斑馬魚,可在熒光顯微鏡在觀察到免疫力低下的斑馬魚體內(nèi)的巨噬細(xì)胞熒光強(qiáng)度明顯減弱。
【實(shí)驗(yàn)方案】利用斑馬魚模型評(píng)價(jià)調(diào)節(jié)免疫功效—巨噬細(xì)胞
我們將受測試斑馬魚分成三組,分別是正常對(duì)照組、模型對(duì)照組和服用免疫調(diào)節(jié)劑組。其中正常對(duì)照組未注射長春瑞濱,模型對(duì)照組與服用免疫調(diào)節(jié)劑組都注射了等量的長春瑞濱(長春瑞濱通過靜脈注射的方式攝入到斑馬魚體內(nèi))。服用免疫調(diào)節(jié)劑組在注射長春瑞濱后攝入鹽酸小檗胺等免疫調(diào)節(jié)劑。
服用一段時(shí)間免疫調(diào)節(jié)劑后,我們觀察巨噬細(xì)胞熒光強(qiáng)度變化。
【結(jié)果展示】
圖1. 斑馬魚巨噬細(xì)胞表型圖
綠色熒光顆粒代表巨噬細(xì)胞
可以看到,免疫調(diào)節(jié)劑組巨噬細(xì)胞熒光強(qiáng)度與正常對(duì)照組相似,沒有出現(xiàn)巨噬細(xì)胞熒光強(qiáng)度明顯減弱的情況。
【評(píng)價(jià)結(jié)論】
1. 經(jīng)過每組30尾斑馬魚的對(duì)比實(shí)驗(yàn),免疫調(diào)節(jié)劑組巨噬細(xì)胞數(shù)量與正常對(duì)照組相似,并未出現(xiàn)模型對(duì)照組免疫力低下的情況。
2. 本實(shí)驗(yàn)證實(shí)了鹽酸小檗胺具有增強(qiáng)免疫力的功效。