醫(yī)藥級乳酶生化學(xué)藥原料藥CDE備案登記

醫(yī)藥級乳酶生化學(xué)藥原料藥CDE備案登記

醫(yī)藥級乳酶生化學(xué)藥原料藥CDE備案登記

本品為白色或淡黃色粉末，無糜爛臭或其他惡臭。 【鑒別】 （1）牛奶凝固力 取本品0.3g，加至20ml牛奶培育基（取新穎牛奶或市售純牛奶，分裝至100ml離心管，于4～8℃，以每分鐘5000轉(zhuǎn)離心5～10分鐘，去除上層脂肪層；或取新穎牛奶置沸水浴中煮30分鐘，于2～10℃放置18小時(shí)以上，使乳脂析出，取脫脂溶液。將制備好的脫脂牛奶分裝于試管中，每管20ml，于115℃濕熱滅菌20分鐘?；蛉∶撝谭?，制成10%～15%溶液，分裝 ，于115℃濕熱滅20分鐘）中，搖勻，作為供試品管，取2管平行 實(shí)驗(yàn)；另取牛奶培育基20ml作為對看管，在37℃培育48小時(shí)（必要時(shí)延長至72小時(shí)）。對看管牛奶應(yīng)無凝固現(xiàn)象，供試品管牛奶應(yīng)凝固。 （2）染色鏡檢 自含量測定項(xiàng)下計(jì)數(shù)平皿中，選取具有透明圈的3～5個(gè)菌落涂片，革蘭染色，鏡檢。應(yīng)為陽性球菌，菌體呈單個(gè)、短鏈或成對排列。 （3）運(yùn)動(dòng)性檢查 自含量測定項(xiàng)下計(jì)數(shù)平皿中，選取具有透明圈的不同形態(tài)菌落各2個(gè)，分別接種于含量測定項(xiàng)下的含糖牛肉湯培育基中，置37℃培育24小時(shí)，取培育物，以懸滴法察看。應(yīng)無運(yùn)動(dòng)性。 （4）酸度 取鑒別（3）項(xiàng)下含糖牛肉湯培育物適量，接種于鑒別（1）項(xiàng)下牛奶培育基20ml中，作為供試品管；另取牛奶培育基20ml，作為對看管。分別置37℃培育48小時(shí)，取供試品管和對看管培育物各5ml，分別加水20ml和酚酞指示液3滴，用氫氧化鈉滴定液（0.1mol/L）滴定至溶液顯淡紅色，并堅(jiān)持1分鐘不褪。兩者耗費(fèi)氫氧化鈉滴定液（0.1mol/L）毫升數(shù)的差值，應(yīng)不小于2ml。 （5）乳酸鑒別 取鑒別（4）項(xiàng)下供試品管和對看管的培育物各1ml，分別加10%硫酸溶液3~5滴，振搖，加乙約10ml，強(qiáng)力振搖，放置數(shù)分鐘，取上層乙液，置水浴中，蒸去乙，殘?jiān)铀?ml，搖勻，各取0.2ml，分別加硫酸2ml，搖勻，置水浴中加熱2分鐘，取出，立即用冷水冷卻，分別滴加10%愈創(chuàng)木酚的乙醇溶液1滴，振搖。對看管應(yīng)顯橙色，供試品管應(yīng)顯紅色。 （6）生化反響 自含量測定項(xiàng)下計(jì)數(shù)平皿中，挑取具有透明圈的菌落適量，分別接種于山梨醇、L-阿拉伯糖、甘露醇、D-棉子糖生化管（取牛肉膏5g、蛋白胨5g、酵母浸膏5g、吐溫80 0.5ml、瓊脂1.5g與1.6%溴甲酚紫酒精溶液1.4ml，加蒸餾水溶解并稀釋至1000ml，按0.5%參加所需糖類或醇類，分裝小試管，115℃濕熱滅菌20分鐘）中，置37℃培育24～48小時(shí)。山梨醇、D-棉子糖反響呈陰性，L-阿拉伯糖、甘露醇反響呈陽性。 【檢查】 枯燥失重 取本品，在105℃枯燥至恒重，減失重量不得過5.0%（通則0831）。 雜菌 取本品，照微生態(tài)活菌制品總論項(xiàng)下的辦法檢查（《中國藥典》三部），非致病性雜菌數(shù)測定采用磷酸鹽緩沖液營養(yǎng)瓊脂培育基[每1000ml營養(yǎng)瓊脂培育基（胨10.0g，氯化鈉5.0g，牛肉浸出粉3.0g，瓊脂14.0g，水1000ml，取上述成分混合，微溫溶解，調(diào)理pH為弱堿性，煮沸，濾清，調(diào)理pH值使滅菌后為7.2±0.2）中，參加磷酸二氫鉀3.56g、磷酸氫二鈉7.23g，溶解，混勻，分裝，121℃濕熱滅菌20分鐘]。除屎腸球菌外，1g供試品中含非致病菌性雜菌數(shù)不得過500cfu，含真菌數(shù)不得過100cfu，不得檢出大腸埃希菌、金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、沙門菌和志賀菌。 【含量測定】 培育基制備辦法 培育基可按以下處方制備，也能夠運(yùn)用按該處方消費(fèi)的契合請求的商品化培育基。配制后，應(yīng)采用考證合格的滅菌程序滅菌。 1.含糖牛肉湯培育基 牛肉膏 3g 氯化鈉 5g 胨 10g 乳糖 20g 水 1000ml 取上述成分，混合，微溫溶解，調(diào)理pH值使滅菌后為6.0，115℃濕熱滅菌20分鐘。 2.1%碳酸鈣含糖牛肉瓊脂培育基 按上述含糖牛肉湯培育基的處方和制法，參加溴甲酚紫0.06g、碳酸鈣10g、瓊脂15～20g，加熱溶解，混勻，分裝，115℃濕熱滅菌20分鐘。 測定法 接種與培育 無菌稱取本品10g，加無菌的0.9%氯化鈉溶液至100ml，加適量無菌玻璃珠，搖勻，制成1：10的混懸液，取上述混懸液，用無菌的0.9%氯化鈉溶液梯度稀釋。取3個(gè)連續(xù)適合稀釋度的混懸液1ml，置無菌平皿中，每個(gè)稀釋級至少2個(gè)平皿中，注入15～20ml溫度不超越45℃的1%碳酸鈣含糖牛肉瓊脂培育基，混勻，凝固，倒置，于37℃培育48小時(shí)，察看結(jié)果。有透明圈的菌落為乳酸菌。 菌落計(jì)數(shù) 選取均勻菌落數(shù)為10～300cfu的稀釋級，作為菌落報(bào)告的根據(jù)。以最高的均勻菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)的值報(bào)告每1g樣品所含的活乳酸菌數(shù)（取兩位有效數(shù)字，若兩個(gè)平皿的菌落數(shù)相差1倍以上，需重新實(shí)驗(yàn)）。 【類別】 助消化藥。 【貯藏】 密封，遮光，在涼暗處保管。