利用斑馬魚模型評價改善貧血功效【評價原理】
貧血是指人體外周血紅細胞容量減少,低于正常范圍下限的一種常見的臨床癥狀。斑馬魚造血系統(tǒng)的形成,包括紅系、髓系、淋系及巨核系為主的造血系統(tǒng),其相關(guān)的轉(zhuǎn)錄因子及信號轉(zhuǎn)導通路同人類有高度的同源性,這些特點使斑馬魚在人類造血系統(tǒng)和血液疾病的研究中有著更加廣泛的應用。由于斑馬魚早期出現(xiàn)血液循環(huán)時胚胎透明,可通過染色劑在顯微鏡直接觀察心臟紅細胞的數(shù)量。
苯肼導致紅細胞外翻和氧化應激產(chǎn)生,紅細胞外翻能夠引起血細胞聚集,氧化應激產(chǎn)生導致內(nèi)皮細胞損傷,進而導致血小板聚集、纖維蛋白原形成,終誘導血栓發(fā)生。
用特異性紅細胞染色劑(呈紅色),貧血斑馬魚心臟部位的紅細胞較正常斑馬魚明顯減少,在解剖顯微鏡下可以觀察到。
利用斑馬魚模型評價改善貧血功效【實驗方案】
我們將受測試斑馬魚分成三組,分別是正常對照組、模型對照組和服用補血藥物組。其中正常對照組未經(jīng)任何處理,模型對照組與服用補血藥物組都攝入了等量的苯肼(苯肼通過溶解到養(yǎng)魚用水中的方式攝入到斑馬魚體內(nèi))。服用補血藥物組先攝入生血寧之類的改善貧血藥物后再攝入苯肼。
服用改善貧血藥物一段時間后,再加入苯肼共同處理一段時間后,我們對斑馬魚整體做紅細胞特異性染色,終分析斑馬魚的紅細胞信號強度。
【結(jié)果展示】
圖1. 斑馬魚貧血表型圖
可以看到,模型對照組紅細胞信號強度較正常對照組明顯減少,服用補血藥物組的紅細胞信號強度與正常對照組比較相似,沒有明顯的紅細胞減少情況。
【評價結(jié)論】
1.經(jīng)過每組30尾斑馬魚的對比實驗,服用補血藥物組的紅細胞信號強度與正常對照組相似,并未出現(xiàn)模型對照組紅細胞減少的情況。
2.本實驗證實了生血寧具有明顯改善貧血的功效。