利用斑馬魚模型評價降血脂作用【評價原理】
蛋黃粉中60%為脂類,用蛋黃粉喂食斑馬魚,可以使斑馬魚血液中的脂肪含量快速升高,從而建立斑馬魚高血脂癥模型。
經(jīng)過油紅O特異性脂肪染色(與組織內(nèi)甘油三酯等脂肪滴結(jié)合呈橘紅色),高血脂斑馬魚血管內(nèi)肉眼可見明顯的脂質(zhì)聚積,通過靜脈注射,可見熒光標記膽固醇的積累。
我們評價斑馬魚降低血脂功效有4個指標:1.斑馬魚血脂表型圖;2.斑馬魚總甘油三脂含量;3.斑馬魚膽固醇表型圖;4.斑馬魚總膽固醇含量。
利用斑馬魚模型評價降血脂作用【實驗方案】
我們先將測試斑馬魚喂食蛋黃粉和熒光標記的膽固醇(蛋黃粉和熒光標記的膽固醇通過溶解到養(yǎng)魚用水中的方式攝入到斑馬魚體內(nèi)),建立高血脂模型后,再將受測試斑馬魚分成兩組,分別是模型對照組和服用降脂劑組,服用降脂組攝入阿托伐他汀鈣、辛伐他汀、洛伐他汀之類的降脂劑。
服用一段時間降脂劑后,我們對斑馬魚整體做脂肪特異性染色,觀察體內(nèi)甘油三酯聚積的變化,以及觀察體內(nèi)膽固醇的聚積情況,同時利用甘油三酯和膽固醇試劑盒檢測斑馬魚體內(nèi)甘油三酯和膽固醇含量的變化。
【結(jié)果展示】
圖1. 斑馬魚血脂表型圖
橘紅色脂滴為血脂
可以看到,服用降脂劑組的血脂聚積情況與模型對照組比較明顯減少。
圖2. 斑馬魚膽固醇表型圖
紅色為熒光膽固醇
可以看到,服用降脂劑組的膽固醇熒光強度與模型對照組比較明顯減少。
圖3. 斑馬魚總膽固醇含量(mmol/gprot)
與模型對照組比較,** p < 0.01
從生化指標可以看出,服用降脂劑組的斑馬魚整體總膽固醇含量與模型對照組比較明顯降低。
圖4. 斑馬魚甘油三酯含量(mmol/gprot)
與模型對照組比較,*** p < 0.001
從實驗結(jié)果可以看出,服用降脂劑組的斑馬魚整體甘油三酯含量與模型對照組比較明顯降低。
【評價結(jié)論】
1.經(jīng)過每組30尾斑馬魚的對比實驗,服用降脂產(chǎn)品組的血脂聚積情況與模型對照組比較明顯減少。
2.本實驗證實了阿托伐他汀鈣、辛伐他汀、洛伐他汀類降脂產(chǎn)品具有顯著的降脂降膽固醇作用。