利用斑馬魚模型評價保護聽力作用【評價原理】
氨基糖苷類抗生素——新霉素會損傷人的內(nèi)耳,影響內(nèi)耳的聽覺和位置感受等功能。斑馬魚具有典型的內(nèi)耳結(jié)構(gòu),內(nèi)耳的毛細胞在結(jié)構(gòu)功能及分子水平上與哺乳動物的內(nèi)耳毛細胞非常相似。在新霉素作用下也會出現(xiàn)聽細胞損傷。
經(jīng)過DASPEI特異性熒光染色(呈綠色),聽力損傷的斑馬魚比正常斑馬魚毛細胞明顯減少或缺失(熒光減弱或者消失)。
利用斑馬魚模型評價保護聽力作用【實驗方案】
我們將受測試斑馬魚分成三組,分別是正常對照組、模型對照組和服用聽保護劑組。其中正常對照組未攝入新霉素,模型對照組與服用聽保護劑組都攝入了等量的新霉素(新霉素通過溶解到養(yǎng)魚用水中的方式攝入到斑馬魚體內(nèi))。服用聽保護劑組在攝入新霉素的同時攝入谷胱甘肽之類的聽保護劑。
服用一段時間聽保護劑后,我們對斑馬魚整體做毛細胞特異性染色,觀察毛細胞的變化。
【結(jié)果展示】
圖1. 斑馬魚毛細胞表型圖
綠色熒光顆粒為毛細胞
可以看到,服用聽保護劑組的毛細胞情況與未攝入新霉素的正常對照組比較相似,毛細胞損傷較輕。
【評價結(jié)論】
1.經(jīng)過每組30尾斑馬魚的對比實驗,服用聽保護劑組的毛細胞情況與未攝入新霉素的正常對照組相似,并未出現(xiàn)模型對照組的毛細胞缺失的情況。
2.本實驗證實了谷胱甘肽具有顯著的保護聽力作用。