地塞米松檢測試劑盒
(酶聯(lián)免疫法)
1 原理及用途
地塞米松檢測試劑盒采用間接競爭ELISA方法檢測肌肉組織、牛奶等樣品中的地塞米松(Dexamethasone,DEX),試劑盒由預(yù)包被偶聯(lián)抗原的酶標(biāo)板、酶標(biāo)記物、抗體、標(biāo)準(zhǔn)品及其他配套試劑組成。檢測時,加入標(biāo)準(zhǔn)品或樣品溶液,樣本中的地塞米松藥物和酶標(biāo)板上預(yù)包被偶聯(lián)抗原競爭抗地塞米松藥物抗體,加入酶標(biāo)記物后,用TMB底物顯色,樣本吸光度值與其所含地塞米松藥物含量成負(fù)相關(guān),與標(biāo)準(zhǔn)曲線比較即可得出樣本中地塞米松藥物的殘留量。
2 技術(shù)指標(biāo)
2.1 靈敏度:0.1ppb(ng/ml)
2.2 反應(yīng)模式:25℃,75min
2.3 檢測下限:
肌肉組織 0.2ppb,牛奶 0.5ppb,飼料 1ppb
3 組成
酶標(biāo)板 96孔
標(biāo)準(zhǔn)液:6瓶
高標(biāo)準(zhǔn)液(紅蓋):1瓶
酶標(biāo)記物(紅蓋)1瓶
抗體工作液(藍(lán)蓋)1瓶
底物液A(白蓋)1瓶
底物液B(黑蓋)1瓶
終止液(黃蓋)1瓶
濃縮洗滌液(白蓋1瓶
復(fù)溶液(黃蓋)1瓶
說明書 1份
4 需要的器材和試劑
4.1 儀器:酶標(biāo)儀、打印機(jī)、均質(zhì)器 、氮?dú)獯蹈裳b置、振蕩器、離心機(jī)、刻度移液管、天平(感量0.01g)
4.2 微量移液器:單道20µl-200µl,100µl-1000µl、多道300µl
4.3 試劑:乙酸乙酯、NaOH、正己烷
6 酶聯(lián)免疫試驗(yàn)步驟
6.1 編 號:將樣本和標(biāo)準(zhǔn)品對應(yīng)微孔按序編號,每個樣本和標(biāo)準(zhǔn)品做2孔平行,并記錄標(biāo)準(zhǔn)孔和樣本孔所在的位置。
6.2 加樣反應(yīng):加標(biāo)準(zhǔn)品或樣本100µl/孔到各自的微孔中,然后加抗體工作液50µl/孔,輕輕振蕩5秒混勻,25℃避光反應(yīng)30分鐘。
6.3 洗 滌:將孔內(nèi)液體甩干,用工作洗滌液250µl/孔充分洗滌5次,每次間隔30秒,zui后用吸水紙拍干(拍干后未被清除的氣泡可用干凈的槍頭刺破)。
6.4 加酶反應(yīng):加酶標(biāo)記物100µl/孔,25℃避光反應(yīng)30分鐘。
6.5 洗 滌:同上
6.6 顯 色:加底物液A 50µl/孔,再加底物液B 50µl/孔,輕輕振蕩5秒混勻,25℃避光顯色15分鐘(若藍(lán)色過淺,可適當(dāng)延長反應(yīng)時間)。
6.7 終 止:每孔加入終止液50µl,輕輕振蕩混勻,終止反應(yīng)。
6.8 測吸光值:用酶標(biāo)儀于450nm處測定每孔吸光度值(建議用雙波長450/630nm)。測定應(yīng)在終止反應(yīng)后10分鐘內(nèi)完成。
7 結(jié)果分析
7.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制與計算
以標(biāo)準(zhǔn)液百分吸光率為縱坐標(biāo),對應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)液濃度(ppb)的對數(shù)為橫坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)液的半對數(shù)曲線圖。將樣本的百分吸光率代入標(biāo)準(zhǔn)曲線中,從標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀出樣本所對應(yīng)的濃度,乘以其對應(yīng)的稀釋倍數(shù)即為樣本中待測物的實(shí)際濃度。
若利用試劑盒專業(yè)分析軟件進(jìn)行計算,更便于大量樣本的準(zhǔn)確、快速分析。(索?。?/span>
9 貯藏及保存期
儲藏條件:試劑盒于2-8℃保存,避免冷凍。
保 質(zhì) 期:有效期為1年,生產(chǎn)日期見包裝盒。