呋喃西林快速檢測試劑盒_美國REAGEN進(jìn)口試劑盒貨號 99023    呋喃西林檢測試劑盒    Nitrofurazone   (SEM) ELISA Test Kit    96T    美國REAGEN™呋喃西林酶聯(lián)免疫反應(yīng)測試盒是利用競爭性的酶聯(lián)反應(yīng)原理，用于飼料、魚、蝦和肉類組織（如雞、牛肉和豬肉），雞蛋、蜂蜜、牛奶、血清和尿樣中呋喃西林（SEM）殘留的定量檢測
齊一生物銷售：REAGEN^™呋喃西林酶聯(lián)免疫反應(yīng)測試盒

RND99023

• 概述

REAGEN^™呋喃西林酶聯(lián)免疫反應(yīng)測試盒是利用競爭性的酶聯(lián)反應(yīng)原理，用于飼料、魚、蝦和肉類組織（如雞、牛肉和豬肉），雞蛋、蜂蜜、牛奶、血清和尿樣中呋喃西林（SEM）殘留的定量檢測。檢測肉樣時該試劑盒的前處理方法可作為與AOZ、CAP、SEM、AHD五合一前處理方法統(tǒng)一處理一個樣品，同時檢測幾個項目。該試劑盒有以下特點：

• 高回收率(75%-105%)，多種樣品的低成本提取方法。
• 高靈敏度（0.05ppb）；多樣品低檢測下限（蝦/魚/肉類0.1ppb）。
• 高重復(fù)性。
• 檢測過程只需要不到1.5小時。
• 五合一處理方法更省時、經(jīng)濟(jì)、環(huán)保。

2．試劑盒原理

REAGEN^™呋喃西林酶聯(lián)免疫反應(yīng)測試盒基于競爭性酶聯(lián)反應(yīng)原理，含有呋喃西林(SEM)的抗體已經(jīng)包被于微孔板上。藥物分析時，樣品同SEM-HRP共同被添加到板孔中。如果樣品中含有SEM，會競爭SEM抗體，抑制SEM-HRP與板上包被的抗體結(jié)合。加入底物后，產(chǎn)物的顏色強(qiáng)弱與樣品中SEM的濃度成反比。

呋喃西林快速檢測試劑盒_美國REAGEN進(jìn)口試劑盒3. 試劑盒組成

已包被的酶標(biāo)板（可拆式）                                         12×8 孔

標(biāo)準(zhǔn)液（0，0.025，0.1，0.4，1.6，6.4ppb）                            6×2.0mL

回收用10ppb(Spiking)——可選                                        1×0.8ml

HRP酶標(biāo)抗原(HRP-Conjugated)                                         1×6mL

10×樣品提取液(Sample Extraction Buffer)                             1×25mL

20×濃縮洗液(Wash Solution)                                          1×30mL

終止液(Stop Buffer)                                                  1×20mL

TMB底物(TMB Substrate)                                               1×10mL

50mM 2-硝基苯甲醛(2-Nitrobenzaldehyde)                               1×1.8mL

本試劑盒應(yīng)當(dāng)在2-8℃的溫度下儲存，有效期為一年。如果超過3個月不使用試劑盒，

請將SEM-HRP酶標(biāo)抗原放置-20℃或者冰凍保存。

4.檢測限

5.交叉反應(yīng)

6．未提供的設(shè)備或材料

• 酶標(biāo)儀(450 nm)
• 恒溫培養(yǎng)箱
• 勻漿器
• 蒸干器
• 漩渦振蕩器
• 移液槍(50，100mL，1mL各一支)
• 多道移液器（50-300mL）
• 乙酸乙酯
• 0.1M K₂HPO₄
• 正己烷

7.注意事項

實驗前請閱讀以下文字，以保證獲得實驗效果。

• 標(biāo)準(zhǔn)品中含有呋喃西林，請小心使用。
• 不要使用過期的試劑盒。
• 不同批次的試劑盒不要混用，抗體和微孔板具有盒與批次的特異性。
• 盡量保持室溫20-25℃，避免在通風(fēng)口操作防止溫度過低，過熱和/或者蒸發(fā)。同樣的，不要在陽光直射下實驗，防止過熱及蒸發(fā)。在孵育期間，如果工作臺溫度過低，應(yīng)該鋪墊若干紙巾或者其他物料。
• 水質(zhì)量很重要，確保使用蒸餾或者去離子水。
• 加入樣品或者試劑到空的微孔板時，吸嘴靠于微孔接近底部，并保持接觸。
• 孵育時間的計算越規(guī)范越好，保持添加標(biāo)準(zhǔn)品的*性，先添加標(biāo)準(zhǔn)品后添加樣品。
• 從低濃度到高濃度地添加標(biāo)準(zhǔn)品，降低影響標(biāo)準(zhǔn)品曲線質(zhì)量的風(fēng)險。
• 將微孔板置于放有干燥劑的密封袋中，冷藏保存。

8．樣品的準(zhǔn)備

確保樣品的正確保存，一般來說，樣品在2-4只能保存1-2天，如果要保存更長時間，就要保存在-20冷凍保存，在用之前需要將冷凍的樣品在室溫下或冰箱內(nèi)解凍。

1×樣品提取液

按1：9的比例配制樣品提取濃縮液和雙蒸餾水。

1）飼料（用于檢測添加到飼料中的魚粉、蝦粉或動物組織的SEM）

• 取0.5g勻質(zhì)樣品，加入0.5mL1×樣品提取液，3.5mL蒸餾水，0.5mL 1M HCl和20 µL 50 mM 2-硝基苯甲醛，渦旋振蕩1min；
• 50°C恒溫培養(yǎng)3小時，在培養(yǎng)期間，每1h振蕩5秒；
• 加入5mL 0.1 M K₂HPO₄，0.4 mL 1 M NaOH，6 mL 乙酸乙酯，zui大轉(zhuǎn)速渦旋震蕩1min；
• 室溫下4000g離心10分鐘；
• 取3mL乙酸乙酯上清液（含0.25g初始樣品）到另一試管（避免觸及下層水相！如果

移取液中含有水相，再次4000g離心5分鐘，取上層有機(jī)相），在60-70 °C減壓蒸餾或60-70°C氮氣吹干；

• 用1 mL 正己烷(或者正庚烷)溶解干燥好的樣品；
• 加入1mL1×樣品提取液，zui大轉(zhuǎn)速渦旋振蕩2分鐘；
• 室溫下4000g離心10分鐘；
• 每孔取100 µL下清液，進(jìn)行樣品測試。

稀釋倍數(shù)：4.0

2）魚/蝦/肉（牛肉/雞肉/豬肉）：可用于五合一前處理方法

• 稱取1g勻漿樣品加入0.5mL1×樣品提取液，3.5mL蒸餾水，0.5mL 1M HCl和20µL50 mM 2-硝基苯甲醛，渦旋震蕩30秒；
• 50°C恒溫培養(yǎng)3h，培養(yǎng)期間，每1h振蕩5秒；（說明書后的**標(biāo)記方法可供選擇）
• 加入5mL 0.1 M K₂HPO₄，0.4 mL 1 M NaOH， 6 mL 乙酸乙酯，渦旋震蕩振蕩30s；
• 室溫下（20-25℃）4000g離心10分鐘；
• 取3mL上清液(包含了0.5g的原始樣品)到另一試管（避免觸及下層水相！如果移取液中含有水相，再次4000g離心5分鐘，取上層有機(jī)相），如果出現(xiàn)乳化現(xiàn)象，上清液不足3mL，請85℃水浴3分鐘。在60 -70°C減壓蒸餾或60-70°C氮氣吹干；
• 用1 mL 正己烷(或者正庚烷)溶解干燥好的樣品；（注：肝臟組織富含脂肪、色素等，為防止乳化現(xiàn)象，建議選用4mL正己烷溶解，渦旋震蕩30秒后，再進(jìn)行下一步操作）
• 加入1mL1×樣品提取液，劇烈振蕩1分鐘；
• 室溫下4000g離心10分鐘；
• 每孔取100 µL下清液，進(jìn)行樣品測試。

注意：為了避免過高的背景值，建議用空白樣品做平行，從取3ml乙酸乙酯上清旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)開始。

稀釋倍數(shù)：2.0

3）雞蛋

• 稱取1g雞蛋樣品加入0.5mL1×樣品提取液，3.5mL蒸餾水，0.5mL 1M HCL和20µL 50 mM 2-硝基苯甲醛，劇烈振蕩30秒；
• 50°C恒溫培養(yǎng)3小時，在培養(yǎng)期間，每1h振蕩5秒；（說明書后的**標(biāo)記方法可供選擇）
• 加入5mL 0.1 M K₂HPO₄，0.4 mL 1 M NaOH， 6 mL 乙酸乙酯，渦旋震蕩振蕩30s；
• 室溫下4000g離心10分鐘；
• 取3mL上清液(包含了0.5g的原始樣品) 到另一試管（避免觸及下層水相！如果移取液中含有水相，再次4000g離心5分鐘，取上層有機(jī)相），在60-70℃減壓蒸餾或60-70℃氮氣吹干；
• 用1 mL 正己烷(或者正庚烷)溶解干燥好的樣品；
• 加入1mL1×樣品抽提工作液體，劇烈振蕩2分鐘；
• 室溫下4000g離心10分鐘；
• 每孔取100µL下清液，進(jìn)行樣品測試。

稀釋倍數(shù)：2.0

注意：為了避免過高的背景值，建議用空白樣品做平行，從取3ml乙酸乙酯上清旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)開始。

4）蜂蜜

• 稱取1g蜂蜜加入0.5mL1×樣品提取液，3.5mL雙蒸水，0.5mL 1M HCL和20µL 50 mM 2-硝基苯甲醛，劇烈振蕩1分鐘；
• 50°C恒溫培養(yǎng)3小時；（說明書后的**標(biāo)記方法可供選擇）
• 加入5mL 0.1 M K₂HPO₄，0.4 mL 1 M NaOH ， 6 mL 乙酸乙酯，zui大轉(zhuǎn)速振蕩1min；
• 室溫下4000g離心10分鐘；
• 取3mL上清液(包含了0.5g的原始樣品) 到另一試管（避免觸及下層水相！如果移取液中含有水相，再次4000g離心5分鐘，取上層有機(jī)相），在60 -70°C減壓蒸餾或60-70°C氮氣吹干；
• 用1 mL 正己烷(或者正庚烷)溶解干燥好的樣品；
• 加入1mL1×樣品提取液，劇烈振蕩2分鐘；
• 室溫下4000g離心10分鐘；
• 每孔取100 µL下清液，進(jìn)行樣品測試。

稀釋倍數(shù)：2.0

5）牛奶

• 對于含脂牛奶，取待測牛奶樣品3ml室溫4000g，5min。除去上層脂肪層。（對于脫脂奶粉，次步略）
• 取1ml樣品，加入0.5mL1×樣品提取液，3.5mL雙蒸水，0.5mL 1M HCL和40µL 50 mM 2-硝基苯甲醛，劇烈振蕩1分鐘；
• 50°C恒溫培養(yǎng)3小時；（說明書后的**標(biāo)記方法可供選擇）
• 加入5mL 0.1 M K₂HPO₄，0.4 mL 1 M NaOH，6 mL 乙酸乙酯，zui大轉(zhuǎn)速振蕩1min；室溫下4000g離心10分鐘；
• 取3mL上清液(包含了0.5g的原始樣品) 到另一試管（避免觸及下層水相！如果移取液中含有水相，再次4000g離心5分鐘，取上層有機(jī)相），在60 -70°C減壓蒸餾或60-70°C氮氣吹干；
• 用1 mL 正己烷(或者正庚烷)溶解干燥好的樣品；
• 加入1mL1×樣品提取液，劇烈振蕩2分鐘；
• 室溫下4000g離心10分鐘；
• 每孔取100 µL下清液，進(jìn)行樣品測試。

     稀釋倍數(shù)：2.0

6）血清

• 稱取1g血清加入0.5mL1×樣品提取液，3.5mL雙蒸水，0.5mL 1M HCL和20µL 50 mM 2-硝基苯甲醛，劇烈振蕩1分鐘；
• 50°C恒溫培養(yǎng)3小時；（說明書后的**標(biāo)記方法可供選擇）
• 加入5mL 0.1 M K₂HPO₄，0.4 mL 1 M NaOH ， 6 mL 乙酸乙酯，zui大轉(zhuǎn)速振蕩1min；
• 室溫下4000g離心10分鐘；
• 取3mL上清液(包含了0.5g的原始樣品) 到另一試管（避免觸及下層水相！如果移

取液中含有水相，再次4000g離心5分鐘，取上層有機(jī)相），在60 -70°C減壓蒸餾或60-70°C氮氣吹干；

• 用1 mL 正己烷(或者正庚烷)溶解干燥好的樣品；
• 加入1mL1×樣品提取液，劇烈
• 振蕩2分鐘；
• 室溫下4000g離心10分鐘；

• 每孔取100 µL下清液，進(jìn)行樣品測試。

     稀釋倍數(shù)：2.0

7）尿樣

• 取3ml尿樣，4000g離心5min。
• 離心后稱取1ml，加入0.5mL1×樣品提取液，3.5mL雙蒸水，0.5mL 1M HCL和40µL 50 mM 2-硝基苯甲醛，劇烈振蕩1分鐘；
• 50°C恒溫培養(yǎng)3小時；（說明書后的**標(biāo)記方法可供選擇）
• 加入5mL 0.1 M K₂HPO₄，0.4 mL 1 M NaOH ， 6 mL 乙酸乙酯，zui大轉(zhuǎn)速振蕩1min；
• 室溫下4000g離心10分鐘；
• 取3mL上清液(包含了0.5g的原始樣品) 到另一試管（避免觸及下層水相！如果移取液中含有水相，再次4000g離心5分鐘，取上層有機(jī)相），在60 -70°C減壓蒸餾或60-70°C氮氣吹干；
• 用1 mL 正己烷(或者正庚烷)溶解干燥好的樣品；
• 加入1mL1×樣品提取液，劇烈振蕩2分鐘；
• 室溫下4000g離心10分鐘；
• 每孔取100 µL下清液，進(jìn)行樣品測試。

稀釋倍數(shù)：2.0

10．檢測步驟

試劑的準(zhǔn)備

注意：試劑在使用之前要在室溫下解凍1-2小時，確定在使用前閱讀過注意事項。準(zhǔn)備適量的檢測用試劑，所有的試劑搖勻后使用。準(zhǔn)備足夠所有小管所需的用量，不能將試劑倒回原來的瓶子中，處理試劑時建議用廢棄的瓶子以降低污染的風(fēng)險。齊一生物科技?xì)g迎您訂購咨詢.手機(jī).在線咨詢:1091367877                                  其它產(chǎn)品貨號 99030    巴氏消毒驗證檢測試劑盒    Pasteurization Verification Test Kit    96T    美國REAGEN
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