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產(chǎn)地 | 國產(chǎn) | 規(guī)格 | 100管/96樣、50管/48樣 |
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級別 | 其他 |
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貨號 | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 |
AS6321257 | 半纖維素含量測試盒(比色法) | 100管/96樣 |
AS6321257 | 半纖維素含量測試盒(比色法) | 50管/48樣 |
測定意義
半纖維素是植物細胞壁中與纖維素緊密結(jié)合的多糖混合物,是構(gòu)成細胞初生壁的主要成分,廣泛存在于植物中,是一種新型可利用能源。
測定原理
半纖維素經(jīng)酸處理后轉(zhuǎn)化成還原糖,與DNS生成紅棕色物質(zhì),在540nm有特征吸收峰,吸光值大反映了半纖維素含量。
需自備的儀器和用品、
天平、40目篩,恒溫水浴鍋、烘箱、可見分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔板
試劑組成和配制
試劑一:液體100mL×1瓶,4℃保存。
試劑二:液體20mL×1瓶,4℃保存。
試劑三:液體20mL×1瓶,4℃保存。
試劑四:液體5mL×1瓶,4℃避光保存。
樣品處理
樣品80℃烘干至恒重,粉碎,過40目篩。
測定操作表
空白管 | 測定管 | |
樣本(g) | 0.02 | |
試劑一(μL) | 1000 | |
90℃水浴10min,25℃,8000g離心10min,棄上清 | ||
蒸餾水(μL) | 1000 | |
充分混勻,25℃,8000g離心10min,此步驟重復3次,取沉淀105℃,烘干至恒重 | ||
試劑二(μL) | 200 | 200 |
90℃水浴1h,自然冷卻 | ||
試劑三(μL) | 200 | 200 |
混勻,25℃,8000g離心10min | ||
上清(μL) | 60 | 60 |
試劑四(μL) | 45 | 45 |
蒸餾水(μL) | 195 | 195 |
充分混勻,90℃水浴5min,自然冷卻,25℃,8000g離心10min | ||
取200μL上清液于微量石英比色皿/96孔板,測定540nm處吸光值A(chǔ)。分別記為A空白管和A測定管,ΔA=A測定管-A空白管??瞻坠苤灰鲆还?。 |
計算公式
用微量石英比色皿計算公式如下:
1、標準條件下測定的回歸方程為y = 0.3968x+0.0306,R2=0.9961;x為標準品濃度(mg/mL),y為吸光值。
2、半纖維素含量(mg/g 干重)=(△A-0.0306)÷ 0.3968÷(W÷V樣總)
= 1.01×(△A-0.0306)÷W
b.用96孔板計算公式如下:
1、標準條件下測定的回歸方程為y = 0.1984x+0.0306,R2=0.9961;x為標準品濃度(mg/mL),y為吸光值。
2、半纖維素含量(mg/g 干重)=(△A-0.0306)÷ 0.1984÷(W÷V樣總)
= 2.02×(△A-0.0306)÷W
W:樣品質(zhì)量,g;V樣總:加入提取液體,0.4mL。
檢測限為1mg/g。
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