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當(dāng)前位置:上海撫生實(shí)業(yè)有限公司>>PCR試劑>>PCR檢測(cè)試劑盒>> 鮰愛(ài)德華氏菌PCR檢測(cè)試劑盒價(jià)格
藍(lán)氏賈第鞭毛蟲型PCR檢測(cè)試劑盒供應(yīng)商
產(chǎn)地 | 進(jìn)口 | 產(chǎn)品新舊 | 全新 |
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自動(dòng)化程度 | 其他 |
特點(diǎn):
高特異性:與其他病毒無(wú)交叉反應(yīng),無(wú)非特異性擴(kuò)增;
高靈敏度:檢測(cè)靈敏度可達(dá)10~100;
操作簡(jiǎn)便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時(shí)進(jìn)行多個(gè)檢測(cè);
高通量:多種雙重PCR檢測(cè)以及三重PCR檢測(cè)試劑盒。
產(chǎn)品名稱 | 鮰愛(ài)德華氏菌PCR檢測(cè)試劑盒價(jià)格 |
英文名稱 | Edwardsiella ictaluriPCR |
分類 | PCR檢測(cè)試劑盒 |
樣品 DNA 的制備:
1.用自選方法純化樣品的 DNA,本試劑盒跟市場(chǎng)上大多數(shù)病毒 DNA 提取試劑盒兼 容。。也可以選購(gòu)本公司的一管式病毒 DNAout 或其升級(jí)版柱式病毒 DNAout。 本試劑盒免費(fèi)贈(zèng)送 15 次 DNA 病毒裂解液試用裝(一管式病毒 DNAout 的成分)。
稀釋陽(yáng)性對(duì)照(以 10E2-10E7 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽(yáng)性對(duì)照,只提供可以直接使用的長(zhǎng)為 86bp 的 DNA 片段作為陽(yáng)性對(duì)照。
2.標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
3.用帶芯槍頭分別加入 45 μL 模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4.在 7 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。5.換槍頭,在 6 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
6.換槍頭,在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照到 5 號(hào)管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
7.換槍頭,在 4 號(hào)管中加 5 μL 1×10E5 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照到 4 號(hào)管中,得1×10E4 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。8.重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
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使用及效果:
PCR反應(yīng)特點(diǎn)
(1) 特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對(duì)原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對(duì)原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過(guò)選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級(jí)的起始待測(cè)模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬(wàn)個(gè)細(xì)胞中檢出一個(gè)靶細(xì)胞;在病毒的檢測(cè)中,PCR的靈敏度可達(dá)3個(gè)RFU(空斑形成單位);在細(xì)菌學(xué)中zui小檢出率為3個(gè)細(xì)菌。
(3) 簡(jiǎn)便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好后,即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時(shí)完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無(wú)放射性污染、易推廣。
(4) 對(duì)標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板??芍苯佑门R床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長(zhǎng)度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過(guò)多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點(diǎn), 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無(wú)明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。
PDCD4抗體,兔多抗,抗原親和純化 59-67-6 250mg 0.999IF ICC/IF 煙酸
ELISAKitforHuman25-hydroxyvitaminD-1alphahydroxylase,mitochondrial2138499 20mgProtopanaxdiol HPLC≥98% 15.6-1000 pg/mL原人參二
OX40/CD134抗體,兔多抗,抗原親和純化HPLC≥98%A064320mg/支ELISA 次烏頭原堿
人Fem-1蛋白同源物A(FEM1a)ELISA試劑盒604-80-810mg Narcissoside 31.2-2000 pg/mL水仙苷
Dim2/TXNL4B抗體,兔多抗,抗原親和純化528-43-8C18H18O2Magnolol≥98%ELISA 厚樸
ELISAKitforHumanKiSS-1receptor5mg 1.56-100 ng/mL1-(4-氨丁基)胍硫酸鹽 AGMATINE SULFATE SALT(P)
CCND3抗體,兔多抗,抗原親和純化 55406-53-6 100mg 0.98WB IP N-丁基氨基酸-3--2-丙炔酯
人哆/哆維生素B6激酶(PDXK)ELISA試劑盒500G 0.312-20 ng/mLN,N-二(2-羥乙基)甘氨酸[生物研究用Good's緩沖液中的成分] N,N-Di(2-hydroxyethyl)glycine [Good's buffer component for biological research]>99.0%(T)
馬丁肉湯484-12-8Osthole蛇床子素484-12-8
ELISAKitforHumanCalcium-bindingmitochondrialcarrierproteinAralar2100mg 0.312-20 ng/mL環(huán)己 CYCLOHEXANOL(SG)
大鼠腺導(dǎo)管上皮細(xì)胞 20mg HPLC≥98%Hispidulin用于含量測(cè)定5 x 10^5 cells/T25培養(yǎng)瓶高車前素
IL20RA/IL20R1抗體,兔多抗,抗原親和純化100mgELISA 香葉木素 DIOSMETIN(SH)
人鋅α2糖蛋白(ZAG)ELISA試劑盒487-39-8 20mgPhillygenin HPLC≥98% 0.156-10 ng/mL連翹脂素
BID抗體(FITC),鼠單抗25mgFCM 氫溴酸檳榔堿 ARECOLINE HYDROBROMIDE(RG)
ELISAKitforHumanEstrogenreceptorbeta4382-56-3 10mg Perakine 1.56-100 ng/mL霹靂蘿芙木堿
KLK13/Kallikrein-13抗體,兔多抗537-42-8C16H16O3Pterostilbene≥98%ELISA 紫檀芪
鮰愛(ài)德華氏菌PCR檢測(cè)試劑盒價(jià)格Xylan木聚糖(來(lái)源于櫸樹) 2.5g YPDA培養(yǎng)基
4-異丙苯 CUMINALDEHYDE(SG) 100mg 人基質(zhì)金屬蛋白酶12(MMP-12)ELISA試劑盒
DIHYDROROBINETIN(RG) 100mg ELISAKitforHumanP2Xpurinoceptor7
隱黃質(zhì) CRYPTOXANTHIN, B-(RG) 1mg SLITRK1抗體,兔多抗
低分子量蛋白 Marker 575μg SAE1抗體,鼠單抗
白藜蘆 20mg Resveratrol ELISAKitforHumanChondroitinsulfateproteoglycan4
Wako 010-08725 Agar, Powder 010-08725 胰蛋白胨大豆瓊脂(TSA)(ISO9038-1-2000)
二乙酰 Diacetyl >98.0%(GC) 25ML ELISAKitforHumanProteinS100-A12
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