犬弓形蟲抗體檢測試劑盒
產(chǎn)品咨詢:
動物用弓形蟲IgG抗體檢測試劑盒使用說明
臨床意義
弓形蟲病為人獸共患寄生蟲病,其病原為弓形蟲(Toxoplasma gondii,TO),可由帶蟲的貓、狗等動物傳給人而引起人弓形蟲病,常造成眼、腦的損害,感染孕婦還可能造成畸胎甚至流產(chǎn)。檢測弓形蟲抗體可輔助診斷弓形蟲的感染。
本試劑盒可用于檢測貓、犬、兔、小鼠血清中的特異性弓形蟲抗體(IgG類)。
試劑及用品
1.預(yù)包被板條48/96T; 6.樣本稀釋液(5號液)1支;
2.酶結(jié)合物(1號液)1支; 7.終止液(6號液)1支;
3.洗滌液(2號液)1支; 8.陽性對照血清1支;
4.底物(3號液)1支; 9.陰性對照血清1支;
5.顯色液(4號液)1支; 10.使用說明書1份;
操作方法
1.樣本稀釋:用樣本稀釋液(5號液)將待檢血清按1:100稀釋。陰、陽對照不用稀釋,直接加樣。
2.加樣反應(yīng):樣本檢測孔每孔分別加已稀釋樣本血清100ul。同時設(shè)陰性、陽性及空白對照各1孔,取陰性、
陽性對照各100ul分別加入反應(yīng)孔內(nèi),空白對照孔僅加入100ul樣本稀釋液(5號液)。37℃避光反應(yīng)30分鐘后甩去孔內(nèi)液體,每孔加洗滌液(2號液)1滴,立即用蒸餾水注滿,靜置30秒后甩去,再直接用蒸餾水洗滌四次,每次均需靜置30秒,zui后一次甩去,拍干。
3.加酶反應(yīng):除空白對照孔外其余每孔加酶結(jié)合物(1號液)2滴,37℃避光反應(yīng)30分鐘后甩去孔內(nèi)液體,如上洗滌,拍干。
4.顯色反應(yīng):每孔加底物(3號液)和顯色劑(4號液)各1滴,混勻,37℃下避光顯色10分鐘。加終止液(6號液)1滴,混勻,終止反應(yīng)(加終止液后藍色會變?yōu)辄S色)。
結(jié)果判斷
1.肉眼觀察:陰性對照接近無色,陽性對照呈明顯黃色,表示實驗有效。待檢孔接近無色表示該標(biāo)本為陰性,待檢孔呈明顯黃色表示該標(biāo)本為陽性。
2.儀器判斷:以空白對照調(diào)零用酶標(biāo)儀于450nm(620nm作參比波長)讀取O.D值。待檢孔O.D值大于陰性對照2.1倍者為陽性。當(dāng)陰性對照O.D值低于0.07時按0.07計算。
注意事項
1.試劑盒在2-8℃下保存,有效期六個月。,每次取出時先平衡至室溫后使用。滴瓶每次用后一定要將蓋擰緊,各瓶蓋之間切不可混用。各試劑盒之間不可混用。
2.洗滌時將蒸餾水加滿各孔,每次停放三十秒鐘,甩去孔內(nèi)液體。禁用自來水等其它水源。
3.為提高實驗的可比性建議使用儀器判讀結(jié)果,并對陰性對照測復(fù)孔以減少誤差。
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什么是弓形蟲病?
本病是一種世界性分布的人獸共患原蟲病,在家畜及野生動物中廣泛存在。全國各地均已報道有本病存在.
弓形蟲病的病原是龔地弓形蟲,簡稱弓形蟲。它的整個發(fā)育過程需要兩個宿主。貓是弓形蟲的終宿主,在貓小腸上皮細胞內(nèi)進行類似于球蟲發(fā)育的裂體增殖和配子生殖,zui后形成卵囊,隨貓糞排出體外,卵囊在外界環(huán)境中,經(jīng)過孢子增殖發(fā)育為含有兩個孢子囊的感染性卵囊。