犬病是由偽狂犬病毒(PRV)引起的豬和多種動(dòng)物共患的一種急性傳染病。豬偽狂犬病主要引起仔豬的高死亡率和妊娠母豬的繁殖障礙,流行廣泛,一旦傳入豬群,將導(dǎo)致巨大經(jīng)濟(jì)損失,且很難*。
在豬的預(yù)防免疫工作中,zui值得關(guān)注的就是強(qiáng)化免疫的接種時(shí)機(jī)問題。在過高的抗體水平進(jìn)行免疫,過高的抗體水平還會(huì)中和疫苗,影響疫苗的免疫效果,導(dǎo)致免疫失??;在較低的抗體水平進(jìn)行免疫,又會(huì)出現(xiàn)抗體保護(hù)真空期,威脅豬的健康。該試劑盒檢測(cè)反映抗體水平,利于指導(dǎo)免疫時(shí)機(jī)。
【使用意義】
接種豬偽狂犬疫苗后,并不能保證產(chǎn)生保護(hù)性抗體。由于多種因素可能導(dǎo)致豬不產(chǎn)生或產(chǎn)生低水平豬偽狂犬病毒抗體。通過使用本試劑,對(duì)免疫豬偽狂犬疫苗抗體動(dòng)態(tài)水平進(jìn)行監(jiān)測(cè),能快速準(zhǔn)確的評(píng)價(jià)免疫程序,驗(yàn)證免疫效果;結(jié)合免疫后抗體變化特征,能快速選擇*的第二次免疫時(shí)間,有效的制定和實(shí)施免疫計(jì)劃。
【使用時(shí)間】
①豬偽狂犬病毒疫苗免疫后免疫效果監(jiān)測(cè)
②平時(shí)的抗體監(jiān)測(cè)
【檢測(cè)原理】
包被經(jīng)純化的豬偽狂犬病毒,抗豬IgG抗體作為酶標(biāo)記抗體,利用間接法來檢測(cè)被檢材料中是否含有豬偽狂犬病毒抗體。
【產(chǎn)品內(nèi)容】
1.豬偽狂犬病毒抗原包被微孔板條:96Tx2
2.酶標(biāo)記物:22ml×1
3.樣品稀釋液:20ml×1
4.顯色劑A:12 ml×1
5.顯色劑B:12 ml×1
6.洗滌液(用前1:25稀釋):25 ml×1
7.豬偽狂犬病毒抗體陽性對(duì)照血清:1.5 ml×1
8.豬偽狂犬病毒抗體陰性對(duì)照血清:1.5 ml×1
9.終止液:12 ml×1
10.封口膜:6張
11.密封袋:1個(gè)
12.說明書:1份
【操作步驟】
1.使用前將試劑盒置室溫30分鐘,恢復(fù)至室溫。
2.取所需用量包被微孔板條,設(shè)空白、陰性及陽性對(duì)照各2孔,未用的板條盡快密封,2~8℃保存。
3.陰性、陽性對(duì)照孔分別加陰性、陽性對(duì)照血清100μl;樣品孔每孔先加樣品稀釋液90μl,再加樣品10ul(或樣本1:10稀釋后加100μl);空白對(duì)照孔不加。
4.混勻,置37℃溫浴30分鐘。
5.扣去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,靜置60秒后棄去,重復(fù)洗滌5次,拍干。
6.每孔加酶標(biāo)記物100μl(空白孔除外)。
7.置37℃溫浴30分鐘。
8.洗滌,同步驟5。
9.每孔依次加顯色劑A、顯色劑B各50μl,混勻,37℃避光反應(yīng)10分鐘。
10.每孔加終止液50μl,混勻,置酶標(biāo)儀450nm處測(cè)各孔A值(建議用雙波長450nm、630nm)。
【結(jié)果判定】
1.陰性對(duì)照:正常情況下,陰性對(duì)照孔A值≤0.1;
2.陽性對(duì)照:正常情況下,陽性對(duì)照孔A值≥0.4;
3.臨界值(C.O.)的計(jì)算:臨界值=0.15+陰性對(duì)照孔均值;所有陰性、陽性對(duì)照和樣品的A值均須減去空白平均值后作為計(jì)算值;陰性對(duì)照孔A值大于0.10時(shí)應(yīng)舍棄,如所有陰性對(duì)照孔A值都大于0.10時(shí)須重復(fù)實(shí)驗(yàn);陰性對(duì)照孔低于0.05時(shí)以0.05計(jì)算。
4.結(jié)果判定:
檢測(cè)標(biāo)本A450值≥臨界值判定為本試驗(yàn)陽性;檢測(cè)標(biāo)本A450值<臨界值判定為本試驗(yàn)陰性。
【注意事項(xiàng)】
1.操作時(shí)必須戴手套,穿工作衣,嚴(yán)格健全和執(zhí)行消毒隔離制度。
2.試驗(yàn)結(jié)果的判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn)。
3.樣品稀釋液應(yīng)用加液器加注,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性。
4.洗滌時(shí)各孔均需加滿液體,防止孔口有游離酶不能洗凈。
5.所有樣品洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
6.微孔板從冷藏環(huán)境中取出時(shí)應(yīng)在室溫中平衡至潮氣干盡后方可,未用完的微孔板須放入有干燥劑的密封袋中保存。
7.用于檢測(cè)的樣品應(yīng)保持新鮮。
8.剩余樣品及廢棄物應(yīng)經(jīng)121℃高壓蒸汽滅菌30分鐘,或用5.0g/L次氯酸鈉等消毒劑處理30分鐘后廢棄。
9.不同批號(hào)試劑組分不得混用。
【保存與有效期】
于2~8℃避光保存,有效期自成品檢定合格之日起為12個(gè)月?!旧a(chǎn)企業(yè)】 廣州健侖生物科技有限公司
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說明書下載:豬偽狂犬病IgG毒抗體檢測(cè)試劑盒-使用說明書.pdf