用于 SILAC 的 L--HCl

Thermo Scientific 重和輕氨基酸用于使用細(xì)胞培養(yǎng)氨基酸穩(wěn)定同位素標(biāo)記 (SILAC) 定量試劑盒通過質(zhì)譜分析，對蛋白表達(dá)進(jìn)行特異性分析。這是 L--HCl 的凍干制劑，足以進(jìn)行 1 次 SILAC 實(shí)驗(yàn)。

用于 SILAC 標(biāo)記的重和輕氨基酸的一般特點(diǎn)：

?高效—99% 標(biāo)記可以摻入活細(xì)胞蛋白中
? 靈活—、賴氨酸、和的重和/或輕氨基酸的不同同位素使得對于從 MS 級蛋白酶中獲得的肽進(jìn)行定量測定成為可能
? 多重功能—和賴氨酸的若干可選同位素可用于在各實(shí)驗(yàn)中分析多種處理?xiàng)l件
? 高品質(zhì)添加劑—同位素純度為 >99% 的重氨基酸

細(xì)胞培養(yǎng)氨基酸穩(wěn)定同位素標(biāo)記 (SILAC) 是對復(fù)合蛋白樣品中發(fā)生相對差異變化的蛋白進(jìn)行鑒定和定量測定的有效方法。該方法需要在體內(nèi)通過代謝途徑將“重”¹³C- 或 ¹⁵N 標(biāo)記氨基酸摻入蛋白中，然后通過質(zhì)譜 (MS) 對蛋白進(jìn)行加速和全面的鑒別、表征和定量測定。

用于 SILAC 的 Thermo Scientific 重和輕氨基酸與缺乏必需氨基酸的專業(yè)細(xì)胞培養(yǎng)基聯(lián)用。重和輕 L-賴氨酸和 L-是見的用于肽 SILAC 分析的氨基酸?？奢p松通過賴氨酸和的不同同位素分析多達(dá)三種不同的實(shí)驗(yàn)條件。對于賴氨酸三重實(shí)驗(yàn)，4,4,5,5-D₄ L-賴氨酸和 ¹³C₆¹⁵N₂ L-賴氨酸用于生成與使用輕賴氨酸生成的肽相比質(zhì)量偏移分別為 4- 和 8-Da 的肽。對于三重實(shí)驗(yàn)，¹³C₆ L-和 ¹³C₆¹⁵N₄ L-用于生成與使用輕生成的肽相比質(zhì)量偏移分別為 6- 和 10-Da 的肽。L-是另一種通常用于 SILAC 標(biāo)記的氨基酸，因?yàn)樗堑鞍仔蛄兄幸姷陌被嶂?。是一種非必需氨基酸，有時添加到 SILAC 培養(yǎng)基中，以防止具有高脫氫酶活性的哺乳動物細(xì)胞系中發(fā)生從重至重的代謝轉(zhuǎn)化。

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