呼吸道合胞病毒IgG/IgM抗體ELISA診斷試劑
廣州健侖生物科技有限公司
實(shí)驗(yàn)原理
呼吸道合胞病毒IgG/IgM抗體ELISA診斷試劑可用于ren血清中抗RSV(呼吸道合胞病毒)IgM抗體的體外定性和定量檢測(cè)。
檢測(cè)原理
此固相ELISA試劑盒利用的夾心法原理。包被板上包被了抗原。用對(duì)renIgM具有特異性的酶標(biāo)二抗來檢測(cè)結(jié)合到包被抗原的樣品特異性抗體。底物反應(yīng)后,所顯示的顏色強(qiáng)度與檢測(cè)到的IgM特異性抗體的量成正比。樣品的結(jié)果可直接使用標(biāo)準(zhǔn)曲線得。
實(shí)驗(yàn)步驟:
1) 加100µL標(biāo)準(zhǔn)品和已稀釋樣本于相應(yīng)反應(yīng)孔中,在定性檢測(cè)中只使用標(biāo)準(zhǔn)品B。
2) 封板后室溫(18℃-25℃)溫育60分鐘。
3) 移去粘性金屬板,棄去孔中液體。用300µL洗滌液洗板3次,在吸水紙上拍干。
4) 在每一微孔中加入100µL酶聯(lián)物。
5) 封板后室溫(18℃-25℃)溫育30分鐘。
6) 移去金屬板,棄去孔中液體。用300L洗滌液洗板3次,在吸水紙上拍干。加底物液和終止液時(shí),如果有條件的話,可使用8孔微量移液器。確保底物液和終止液都是相同的時(shí)間間隔加入。使用確切容積并避免氣泡產(chǎn)生。
7) 每孔加TMB底物液100µL。
8) 室溫(18℃-25℃)避光溫育20分鐘。
9) 在每一微孔中加入100µLTMB終止液以終止底物反應(yīng)。輕輕搖動(dòng)包被板以使試劑混合均勻。此時(shí),顏色藍(lán)色變成黃色。
10) 加終止液后60分鐘內(nèi)在450nm處測(cè)OD值。
結(jié)果判定: >12 U/ml 為陽性,8 - 12 U/ml 為可疑,< 8 U/ml 為陰性
此檢測(cè)結(jié)果并不是任何zhi療結(jié)果判定的微一因素,它應(yīng)當(dāng)結(jié)合lin床觀察和診斷結(jié)果加以判斷。
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