大小鼠微透析探針是微透析技術(shù)的核心,選擇合適的探針是是微透析實(shí)驗(yàn)的關(guān)鍵。探針的選擇由植入的區(qū)域、透析物質(zhì)和回收率等因素決定。根據(jù)實(shí)驗(yàn)部位以及目標(biāo)分子的理化性質(zhì)選擇合適的探針實(shí)現(xiàn)活體取樣。
大小鼠微透析探針有多種類型,同心圓探針、線性探針和U型探針等。其中,同心圓探針和線性探針為常用探針類型。
同心圓探針根據(jù)探針用途可分為腦部探針和血液探針。腦部探針如CMA探針有CMA 7、CMA 11和CMA 12。其中CMA 7用于小鼠離散大腦區(qū)的一種細(xì)硬質(zhì)探針,CMA 11則是用于大鼠離散大腦區(qū)的一種細(xì)硬質(zhì)探針,而CMA 12是用于中樞神經(jīng)系統(tǒng)研究的最佳探針,可長(zhǎng)期植入。CMA的血液探針型號(hào)為CMA 20,CMA 20 是一種軟性的金屬探針,主要用于清醒自由活動(dòng)動(dòng)物或麻醉動(dòng)物的肌肉、心臟、皮膚和脂肪等。
線性探針是線性管路的結(jié)構(gòu),管路中間為透析膜,一般用于外周組織,如皮膚、肌肉、心臟、肝臟、眼睛和胰腺等位置,也可以同于腫瘤的植入??筛鶕?jù)實(shí)驗(yàn)需要有相對(duì)應(yīng)截留量的探針進(jìn)行選擇。
微透析系統(tǒng)管路體積都很小,在使用過程中需注意操作規(guī)范。
使用前管路系統(tǒng)檢查
探針接上tubing管前, 先用syringe確認(rèn)tubing管是通的, 無阻塞(若tubing管有阻塞, 會(huì)將探針membrane脹破), 再將探針與tubing管一段一段慢慢接上, 確定管路中無氣泡。
新探針使用
干式探針:探針放入蒸餾水, 注射器充滿蒸餾水, 流速 2 微升/min, 灌流20 min以上。
實(shí)驗(yàn)后探針清洗:
1. 探針先泡肝素液(液態(tài)肝素液可跟蒸餾水對(duì)半稀釋, 粉末狀肝素可跟蒸餾水配(1mg/ml)20 min。
2. 探針換泡蒸餾水, 注射器放蒸餾水, 流速 2 微升/min, 灌流過夜。
使用后保存
可放在蒸餾水中保存探針; 若長(zhǎng)時(shí)間不使用可晾干保存。