組織培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室規(guī)劃設(shè)計(jì)
組織培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室不是植物科學(xué)的分支,如分類學(xué),細(xì)胞學(xué),植物生理學(xué)等。
相反,它是在無菌和受控條件下培養(yǎng)大量分離的細(xì)胞或組織的實(shí)驗(yàn)方法的集合。
細(xì)胞或組織獲自植物如莖,根,葉等的任何部分,其被鼓勵(lì)在培養(yǎng)物中產(chǎn)生更多細(xì)胞并表達(dá)其性(即它們產(chǎn)生更多植物的遺傳能力)。 細(xì)胞或組織在含有具有礦物養(yǎng)分,維生素和植物激素的培養(yǎng)基的不同類型的玻璃小瓶中生長。 因此,為了使用組織培養(yǎng)技術(shù)進(jìn)行實(shí)驗(yàn),首先需要建設(shè)環(huán)境良好的實(shí)驗(yàn)室。組織培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室規(guī)劃設(shè)計(jì)
近年來,使用組織培養(yǎng)技術(shù)研究高等植物的許多基本和應(yīng)用方面的研究實(shí)驗(yàn)室的數(shù)量已經(jīng)大量增加。 然而,這些技術(shù)的使用不于研究。
組織培養(yǎng)技術(shù)正在被許多商業(yè)實(shí)驗(yàn)室利用。 甚至許多園藝公司正在建立小單位以繁殖難以通過常規(guī)方式繁殖的植物。 組織培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室的一般組織和基本技術(shù)將在不同的副標(biāo)題下討論。
組織培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室 :
理想的組織培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室應(yīng)該至少有兩個(gè)大房間和一個(gè)小房間。 一個(gè)大房間是一般實(shí)驗(yàn)室工作,如準(zhǔn)備媒體,高壓滅菌,蒸餾水等。另一個(gè)大房間是為了保持文化在控制光,溫度和濕度。 小房間是用來無菌工作和保持高壓滅菌的。
一般實(shí)驗(yàn)室 :
組織培養(yǎng)的一般實(shí)驗(yàn)室應(yīng)提供以下模塊和安排:
A洗衣區(qū):
這對(duì)于組織培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室非常重要。 它應(yīng)該有一個(gè)大水槽,運(yùn)行冷熱自來水,各種尺寸的刷子,洗滌劑和一桶單一的蒸餾水,用于zui后沖洗洗過的玻璃制品。
需要多個(gè)塑料桶來浸泡待洗滌的玻璃制品。 在清潔之前,還需要具有蓋的另一個(gè)單獨(dú)的桶來處理使用過的或感染的介質(zhì)。 只有這個(gè)桶應(yīng)該放在房間外或清潔區(qū)域,并應(yīng)該清潔兩次 – 在一個(gè)星期。
熱風(fēng)爐:需要干燥經(jīng)洗滌的玻璃制品。 為此目的,需要不同尺寸的許多搪瓷托盤以將濕玻璃制品保持在烘箱內(nèi)。
冰箱:儲(chǔ)存各種熱不穩(wěn)定化學(xué)品,如維生素,激素,氨基酸,酪蛋白水解產(chǎn)物,酵母提取物,椰奶等是*的。還保留鹽的儲(chǔ)備溶液以防止污染。
蒸餾裝置:?jiǎn)握麴s和雙蒸餾水裝置是的。 需要兩個(gè)大塑料容器來儲(chǔ)存蒸餾水。
稱重天平:三種稱重天平 鍋平衡; 化學(xué)平衡和電平衡用于稱量化學(xué)品,糖,瓊脂和其他物質(zhì)。
pH計(jì):有必要測(cè)量和調(diào)整營養(yǎng)培養(yǎng)基的pH值
真空泵 :需要通過使用空氣抽吸的過濾裝置過濾液體介質(zhì),糖溶液等。
高壓滅菌 :這對(duì)營養(yǎng)培養(yǎng)基,玻璃制品,儀器等的滅菌非常重要
工作表 :這些是制備培養(yǎng)基所必需的。
加熱器 :需要加熱或加熱培養(yǎng)基以溶解瓊脂或熔化瓊脂培養(yǎng)基。
顯微鏡 :簡(jiǎn)單,復(fù)合,反向雙目解剖顯微鏡是各種目的*的。 一些顯微鏡應(yīng)該配有相機(jī)拍攝顯微照片。
切片機(jī) :它需要切片培養(yǎng)的組織。
木巖 :這些是保持各種化學(xué)品所必需的。
無菌接種實(shí)驗(yàn)室 :這個(gè)房間應(yīng)該沒有任何窗口或,以使其無塵。 房間應(yīng)設(shè)有雙門。 門應(yīng)該有一個(gè)自動(dòng)閉門器。 內(nèi)部地板應(yīng)安裝橡膠墊,以方便清潔。 進(jìn)入房間,鞋子應(yīng)該留在外面。
對(duì)于無菌工作,一個(gè)大木室(Ca,4’×4’×7’)為短期工作。 腔室的側(cè)壁的上半部分由大玻璃板制成。 該室還應(yīng)該具有設(shè)置有閉門器的雙門。
該室設(shè)有兩個(gè)UV(一個(gè)小,一個(gè)大)消毒燈和熒光燈。 用于操作它們的開關(guān)存在于室外部,使得燈可以安全地接通和斷開。 在室內(nèi),工作臺(tái)和貨架由厚玻璃板制成。
對(duì)于簡(jiǎn)單的常規(guī)工作,例如無菌種子發(fā)芽,從用于細(xì)胞學(xué)工作或用于切片機(jī)制備的無菌原料收獲培養(yǎng)的組織,可以使用小接種罩。 這可以放在一個(gè)小桌子在房間的方便的角落。
層流氣流柜是,方便和可靠的無菌工作儀器。 它允許人們?cè)诮臃N室內(nèi)不可能工作更長的時(shí)間。 接種室內(nèi)長時(shí)間的工作也可能導(dǎo)致窒息并需要中斷工作。 人們可以在層流空氣流的臺(tái)上公開和容易地工作較長時(shí)間。
層流空氣流具有多個(gè)小鼓風(fēng)機(jī)馬達(dá)以吹動(dòng)通過多個(gè)HEPA(高效微??諝猓┻^濾器的空氣。 這種過濾器除去大于0.3μm的顆粒。 沒有真菌和細(xì)菌污染物的超凈空氣以約27±3m / min的速度通過工作區(qū)域流動(dòng)。
所有污染物被超純空氣吹走,從而在工作區(qū)域上保持無菌環(huán)境。 在開始工作之前,層流空氣流通10-15分鐘。 空氣流不會(huì)熄滅精神燈的火焰。 因此,在工作期間可以方便地使用酒精燈。
文化室 :組織培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室是指在受控溫度,光照和濕度下保存或培養(yǎng)培養(yǎng)物的室。 培養(yǎng)室還配有雙門,以使其無塵,并保持恒定的室溫。 一個(gè)人應(yīng)該進(jìn)入文化室保持鞋子在門外。 為了將培養(yǎng)室內(nèi)的溫度保持在25±2℃左右,使用空氣冷卻器。
這個(gè)房間還設(shè)有專門設(shè)計(jì)的擱架,以保存培養(yǎng)皿。 貨架由玻璃或膠合板制成。 瓶,瓶,罐; 陪替氏菌可以直接放在貨架上。 培養(yǎng)管可以保持在支架上,例如熒光燈的空紙蓋。 培養(yǎng)物可以在光照下或黑暗中生長。
對(duì)于燈布置,每個(gè)培養(yǎng)架設(shè)置有熒光燈,這些熒光燈由自動(dòng)定時(shí)器周期性地控制。 用黑色窗簾覆蓋的架子適合于黑暗培養(yǎng)文化。 溫度計(jì)和濕度計(jì)固定在房間安全角的墻上,分別檢查溫度和相對(duì)濕度。
組織培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室的相對(duì)濕度保持在50%以上。 將一些小擱板放置在培養(yǎng)室中,用于臨時(shí)保持高壓滅菌的制品和含有培養(yǎng)基的培養(yǎng)小瓶。 培養(yǎng)室還應(yīng)當(dāng)具有用于懸浮培養(yǎng)或在移動(dòng)液體培養(yǎng)基中的單細(xì)胞培養(yǎng)的振蕩器。 可以控制振動(dòng)器的旋轉(zhuǎn)速度。 振動(dòng)器還提供有光。 振蕩器的平臺(tái)裝配有用于保持錐形瓶(150ml至200ml)的夾子。