焦磷酸測序(Pyrosequencing)技術(shù)是由4種酶(DNA 聚合酶(DNA polymerase)、ATP硫酸化酶(ATP sulfurytase)、熒光素酶(luciferase)和三磷酸腺苷雙磷酸酶(Apyrase))催化的同一反應(yīng)體系中的酶級聯(lián)化學(xué)發(fā)光反應(yīng)。
每一輪測序反應(yīng)體系中只加入一種脫氧核苷酸三磷酸(dNTP)。如果該dNTP與模板配對,則會在DNA 聚合酶的作用下,添加到測序引物的3''末端,同時釋放出一個分子的焦磷酸(PPi)。摻入的dNTP和釋放的PPi是等量的。
ATP硫酸化酶催化PPi與5''-磷酰硫酸(APS)結(jié)合形成ATP,然后在熒光素酶的催化作用下,生成的ATP和熒光素結(jié)合形成氧化熒光素,同時產(chǎn)生可 見光。CCD感應(yīng)器檢測到光信號后,Pyrogram轉(zhuǎn)化為檢測峰,每個峰的高度(光信號)與摻入的核苷酸數(shù)目呈正比。
Apyrase不斷降解未摻入的核苷酸和ATP,淬滅光信號,再生反應(yīng)體系,以此得到整個結(jié)果。
產(chǎn)品特點(diǎn):
● 手動干預(yù)操作少:整合模板制備功能,操作流程*自動化
● 操作簡單:附帶直觀的設(shè)備和分析軟件,便于操控
● 的焦磷酸測序性能:技術(shù)*,提高測序讀長和結(jié)果可靠性
● 更深入的 DNA 甲基化分析:可以在連續(xù)的 CpG 和CpN 位點(diǎn)進(jìn)行甲基化定量檢測
● 單次運(yùn)行處理更多的 SNP 和突變檢測:通過多引物分配提高樣本通量
● 通量更高:提高單次和每天運(yùn)行的樣本檢測數(shù)量
應(yīng)用領(lǐng)域 :
適用于分子生物學(xué)應(yīng)用,不可用于診斷、預(yù)防或治療疾病