概述
* 9%的細(xì)胞轉(zhuǎn)染效率 * 無明顯毒性 * 通過siRNA表達(dá)的基因敲除 * 體內(nèi)外應(yīng)用非病毒轉(zhuǎn)染
應(yīng)用
用于體內(nèi)外RNAi基因敲除的siRNA轉(zhuǎn)染
右上:使用Neuro9 siRNA處理富集(>90%)E18大鼠初級皮層神經(jīng)元DIV12以對抗HPRT表達(dá)。治療后48h用qPCR檢測HPRT mRNA。*** P < 0.001
中間:使用Neuro9 siRNA處理富集(>90%)E18大鼠初級皮層神經(jīng)元DIV12以對抗HPRT表達(dá)48h后。細(xì)胞毒性用PrestoBlue檢測。
右下:在不同成熟階段使用Neuro9 siRNA對抗PTEN對大鼠初級神經(jīng)元進(jìn)行處理。
Neuro9耐受性良好,可應(yīng)用于DIV≥2 。這種靈活性為新的實(shí)驗(yàn)可能性打開了大門。*** P < 0.001
Neuro9在體外細(xì)胞培養(yǎng)和轉(zhuǎn)染
siRNA: >95%細(xì)胞轉(zhuǎn)染效率
熒光標(biāo)記的Nruro9(紅)用于觀察MAPS+神經(jīng)攝?。?span style="font-family: 微軟雅黑, "Microsoft YaHei"; color: rgb(0, 176, 80);">綠)
流式細(xì)胞術(shù)結(jié)果說明Neuro9的細(xì)胞攝取
Neuro9在體內(nèi)細(xì)胞培養(yǎng)和轉(zhuǎn)染
siRNA: >95%細(xì)胞轉(zhuǎn)染效率
Neuro9(紅)局部注射入大鼠體感皮質(zhì)層。5天后移除腦部,切片并成像。Calcein-AM染料(綠)表明在成像時(shí)神經(jīng)元是活的。用Luc siRNA處理后,與另半邊腦的對照樣品相比,來自注射部位1mm樣品的Western blots結(jié)果顯示了靶基因PTEN的敲除現(xiàn)象。