過敏反應(yīng)通常會引起許多皮膚癥狀，比如皮膚發(fā)紅、發(fā)癢，嚴(yán)重的患者還會出現(xiàn)刺痛或者面部出現(xiàn)紅斑、風(fēng)團(tuán)、丘疹或丘皰疹等癥狀。一些醫(yī)美類化妝品除具有常規(guī)護(hù)膚功效外還能起到抗過敏作用。通過斑馬魚技術(shù)能有效評價化妝品及其原料對過敏反應(yīng)的抑制作用。
【評價原理】
過敏反應(yīng)的主要原因是過敏原/致敏因子誘導(dǎo)組織學(xué)上肥大細(xì)胞脫顆粒，釋放多種活性介質(zhì)進(jìn)而誘發(fā)各種過敏癥狀。其中類胰蛋白酶是肥大細(xì)胞內(nèi)預(yù)先合成的中性蛋白酶，是臨床上檢驗人體是否過敏的重要指標(biāo)。斑馬魚產(chǎn)生過敏反應(yīng)時，同樣會誘導(dǎo)肥大細(xì)胞分泌類胰蛋白酶。因此，通過檢測斑馬魚整體類胰蛋白酶水平可以判斷化妝品及其原料的抗過敏作用。
【實驗方案】
我們將受測試斑馬魚分成若干組，分別含正常對照組、模型對照組和化妝品組。其中正常對照組未經(jīng)C48/80處理，模型對照組和化妝品組都用C48/80處理（C48/80通過溶解到標(biāo)準(zhǔn)稀釋水中的方式攝入到斑馬魚體內(nèi)，C48/80是一種能讓皮膚表面產(chǎn)生過敏反應(yīng)的物質(zhì)），化妝品組另需加入相應(yīng)濃度的化妝品樣品。
處理24 h后，利用酶標(biāo)儀檢測各組吸光度值（OD值），以類胰蛋白酶的表達(dá)水平評價化妝品抗過敏作用。
此外，可以通過斑馬魚病理切片，用PAS染色后觀察腸道壁上肥大細(xì)胞的狀況反映化妝品的抗敏作用。
【結(jié)果展示】（展示圖片僅供參考，實際實驗組別依據(jù)合同而定）
圖1. 化妝品處理后斑馬魚吸光度值
與模型對照組比較，*p < 0.05
圖2. 化妝品處理后斑馬魚的致敏作用
與模型對照組比較，*p < 0.05
可以看到，使用化妝品的濃度組類胰蛋白酶含量與模型對照組比較明顯降低。
圖3. 斑馬魚體內(nèi)肥大細(xì)胞染色典型圖（箭頭指示為肥大細(xì)胞，PAS 1000×）
從病理切片中也能看出來，模型對照組斑馬魚的腸道壁上的肥大細(xì)胞與正常對照組相比數(shù)量顯著上升，而經(jīng)色甘酸鈉和化妝品處理的斑馬魚腸道肥大細(xì)胞相對于模型對照組明顯減少。
【評價結(jié)論】
1.經(jīng)過各組斑馬魚的對比實驗，模型對照組斑馬魚的腸道壁上的肥大細(xì)胞與正常對照組相比數(shù)量顯著上升，而經(jīng)色甘酸鈉和化妝品處理的斑馬魚腸道肥大細(xì)胞相對于模型對照組明顯減少。
2.本實驗證實了色甘酸鈉和該化妝品具有抗過敏功效。
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