利用斑馬魚模型評價軟骨修復(fù)功效【評價原理】
關(guān)節(jié)軟骨受到急性外傷和慢性磨損,出現(xiàn)不同程度的損傷,導(dǎo)致關(guān)節(jié)疼痛、活動受限,甚至功能喪失。關(guān)節(jié)軟骨的修復(fù)主要靠軟骨細胞的增殖分化,生產(chǎn)足夠的細胞外基質(zhì)修復(fù)軟骨缺損。人軟骨細胞通常是靜止的,血管化程度低,營養(yǎng)主要來源于關(guān)節(jié)液和軟骨下骨,修復(fù)再生則顯得十分有限,需要外源性的手段來輔助修復(fù)。地塞米松破壞軟骨細胞的代謝平衡,引起軟骨細胞的死亡或凋亡,從而引起軟骨損傷。斑馬魚的骨骼發(fā)育與其他脊椎動物骨骼發(fā)育過程極其相似,因此,可用于軟骨修復(fù)功效評價。
斑馬魚的軟骨主要分布于頭部,包括七對咽顱軟骨弓(下頜弓、舌弓及五對鰓弓)和腦顱軟骨。基于轉(zhuǎn)基因軟骨熒光斑馬魚特性,患有軟骨損傷的斑馬魚的軟骨熒光強度會明顯比正常斑馬魚的軟骨熒光強度要暗很多,可以明顯被觀察到。
利用斑馬魚模型評價軟骨修復(fù)功效【實驗方案】
我們將受測試軟骨熒光斑馬魚分成三組,分別是正常對照組、模型對照組和軟骨修復(fù)產(chǎn)品組。其中正常對照組未攝入地塞米松,模型對照組與服用軟骨修復(fù)產(chǎn)品組都攝入了等量的地塞米松(地塞米松通過溶解到養(yǎng)魚用水中的方式攝入到斑馬魚體內(nèi))。服用軟骨修復(fù)產(chǎn)品組在攝入地塞米松的同時攝入硫酸軟骨素之類的軟骨修復(fù)產(chǎn)品。
服用一段時間軟骨修復(fù)產(chǎn)品后,我們觀察軟骨熒光的變化。
【結(jié)果展示】
圖1. 斑馬魚軟骨表型圖
綠色熒光為斑馬魚頭部軟骨
可以看到,服用軟骨修復(fù)產(chǎn)品組的軟骨情況與未攝入地塞米松的正常對照組比較相似,沒有明顯的軟骨損傷。
【評價結(jié)論】
1.經(jīng)過每組30尾斑馬魚的對比實驗,服用軟骨修復(fù)產(chǎn)品組的軟骨情況與未攝入地塞米松的正常對照組相似,并未出現(xiàn)模型對照組的軟骨損傷的情況。
2.本實驗證實了硫酸軟骨素具有明顯軟骨修復(fù)功效。