利用斑馬魚模型評價(jià)半數(shù)致死濃度
【評價(jià)原理】
半數(shù)致死濃度(LC50)是指在動(dòng)物急性毒性實(shí)驗(yàn)中,使受試動(dòng)物半數(shù)死亡的毒性濃度。在比較各種污染物的毒性,不同種或不同發(fā)育階段的動(dòng)物對污染物的敏感性以及環(huán)境因素對毒性影響等方面的研究中,都以LC50為依據(jù)。常規(guī)急性毒性實(shí)驗(yàn)常采用嚙齒類和非嚙齒類動(dòng)物進(jìn)行,能較準(zhǔn)確地反映食品及保健食品的安全性,但實(shí)驗(yàn)周期一般較長,用量較大。用斑馬魚胚胎檢驗(yàn)食品及保健食品的急性毒性,具有體積小,成本低,易于飼養(yǎng),重復(fù)性好,便于觀察,繁殖周期短,繁殖頻率高,給藥方式簡單等諸多優(yōu)點(diǎn)。因此斑馬魚是一種理想的試驗(yàn)?zāi)P?,用以確定食品及保健品暴露在胚胎中的毒性效應(yīng),評價(jià)其半數(shù)致死濃度。
根據(jù)實(shí)驗(yàn)終點(diǎn)斑馬魚的死亡率,通過使用OriginPro 8.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件,擬合半數(shù)致死濃度。
【實(shí)驗(yàn)方案】利用斑馬魚模型評價(jià)半數(shù)致死濃度
我們將供試品(保健食品)設(shè)置一系列濃度,并設(shè)置一個(gè)正常對照組。同時(shí)設(shè)置3個(gè)生物學(xué)重復(fù)。藥物通過溶解到養(yǎng)魚用水中或灌胃的方式攝入到斑馬魚體內(nèi)進(jìn)行3天的暴露實(shí)驗(yàn)。
每天觀察記錄斑馬魚死亡情況,藥物處理結(jié)束后,統(tǒng)計(jì)各實(shí)驗(yàn)組的斑馬魚致死率,使用OriginPro 8.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件繪制佳的劑量效應(yīng)曲線,并計(jì)算LC50。
【結(jié)果展示】
圖1. 斑馬魚“濃度-死亡率”效應(yīng)曲線
可以看到,利用OriginPro 8.0軟件模擬得出保健食品LC50= 8.0 μg/mL。
【評價(jià)結(jié)論】
1. 根據(jù)保健食品“濃度-死亡率”統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù),利用OriginPro 8.0軟件模擬得出LC50=8.0 μg/mL。