多肽的合成是氨基酸重復(fù)添加的過程，通常從C端向N端(氨基端)進(jìn)行合成。多肽固相合成的原理是將目的肽的*個氨基酸C端通過共價鍵與固相載體連接，再以該氨基酸N端為合成起點，經(jīng)過脫去氨基保護(hù)基和過量的已活化的第二個氨基酸進(jìn)行反應(yīng)，接長肽鏈，重復(fù)操作，達(dá)到理想的合成肽鏈長度，后將肽鏈從樹脂上裂解下來，分離純化，獲得目標(biāo)多肽。
1、Boc多肽合成法
Boc方法是經(jīng)典的多肽固相合成法，以Boc作為氨基酸α-氨基的保護(hù)基，芐醇類作為側(cè)鏈保護(hù)基，Boc的脫除通常采用三(TFA)進(jìn)行。多肽合成時將已用Boc保護(hù)好的N-α-氨基酸共價交聯(lián)到樹脂上，TFA切除Boc保護(hù)基，N端用弱堿中和。
肽鏈的延長通過二環(huán)己基碳二亞胺(DCC)活化、偶聯(lián)進(jìn)行，終采用強(qiáng)酸(HF)法或三氟甲磺酸(TFMSA)將合成的目標(biāo)多肽從樹脂上解離。在Boc多肽合成法中，為了便于下一步的多肽合成，反復(fù)用酸進(jìn)行脫保護(hù)，一些副反應(yīng)被帶入實驗中，例如多肽容易從樹脂上切除下來，氨基酸側(cè)鏈在酸性條件不穩(wěn)定等。
2、Fmoc多肽合成法
Carpino和Han以Boc多肽合成法為基礎(chǔ)發(fā)展起來一種多肽固相合成的新方法——Fmoc多肽合成法。
Fmoc多肽合成法以Fmoc作為氨基酸α-氨基的保護(hù)基。其優(yōu)勢為在酸性條件下是穩(wěn)定的，不受TFA等試劑的影響，應(yīng)用溫和的堿處理可脫保護(hù)，所以側(cè)鏈可用易于酸脫除的Boc保護(hù)基進(jìn)行保護(hù)。
肽段的后切除可采用TFA/二氯甲烷(DCM)從樹脂上定量完成，避免了采用強(qiáng)酸。同時，與Boc法相比，F(xiàn)moc法反應(yīng)條件溫和，副反應(yīng)少，產(chǎn)率高，并且Fmoc基團(tuán)本身具有特征性紫外吸收，易于監(jiān)測控制反應(yīng)的進(jìn)行。Fmoc法在多肽固相合成領(lǐng)域應(yīng)用越來越廣泛。
多肽合成服務(wù)種類
多肽合成服務(wù)通常有線性肽合成服務(wù)、多種難肽合成服務(wù)、修飾肽合成服務(wù)、以及部分多肽合成公司還會提供多肽定制服務(wù)，定制出有針對性的合成肽。
目前有多肽合成公司提供的線性肽合成可達(dá)150個氨基酸以內(nèi)，在修飾肽合成上，能提供常見修飾，磷酸肽，RGD環(huán)肽，熒光標(biāo)記肽（Cy3、Cy5、Fitc、AMC等），生物素標(biāo)記肽/復(fù)合抗原（MAP）/含D型氨基酸,及各種氨基酸衍生物均可合成。
多肽產(chǎn)物純度選擇
常見的質(zhì)譜級多肽純度，一般要求>95%
用于抗體篩選純度，一般>85%即可
NMR和結(jié)晶試驗中，純度一般>98%
粗品肽，一般>50%即可用于多肽篩選
國肽生物主要提供：多肽合成、多肽定制、同位素標(biāo)記肽、人工胰島素、磷酸肽、生物素標(biāo)記肽、熒光標(biāo)記肽（Cy3、Cy5、Fitc、AMC等）、目錄肽、偶聯(lián)蛋白（KLH、BSA、OVA等）、美容肽、化妝品肽、多肽文庫構(gòu)建、抗體服務(wù)、糖肽、訂書肽、藥物肽、RGD環(huán)肽等。詳情請咨詢國肽生物
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