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Blood Taq DNA聚合酶(免提?。?a href="javascript:void(0)" onclick="addCompareForDetail(this)" data-id='2029660' data-classid='2925' data-name='Blood Taq DNA聚合酶(免提?。? class="comBtn" target="_self">

參考價面議
具體成交價以合同協(xié)議為準(zhǔn)
  • 公司名稱上海李記生物科技有限公司
  • 品       牌
  • 型       號D1010L1179
  • 所  在  地上海市
  • 廠商性質(zhì)生產(chǎn)廠家
  • 更新時間2017/12/28 14:51:17
  • 訪問次數(shù)754
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        上海李記生物科技有限公司是一家集研發(fā)、生產(chǎn)、銷售為一體的企業(yè)。李記生物立志做精品,產(chǎn)品涵蓋細(xì)胞生物學(xué)、分子生物學(xué)、動物學(xué)等領(lǐng)域,我們的產(chǎn)品都基于*設(shè)計(jì),在保證品質(zhì)的前提下,具有易用、經(jīng)濟(jì)、高效的特點(diǎn)。 我們立志做百年企業(yè),打造叫得響的國產(chǎn)品牌。很多我們的產(chǎn)品創(chuàng)意來自于像科研一線的客戶老師,我們提供的不僅是產(chǎn)品,還有一個創(chuàng)新的平臺,我們邀請您一起發(fā)展。 我們是一群有理想、有專業(yè)技能的憤青,我們誓要做響一個品牌,我們是國產(chǎn),我們邀請您一起參與。

李記生物優(yōu)勢產(chǎn)品有:

特級胎牛血清( Foetal Bovine Serum)

特優(yōu)級胎牛血清Foetal Bovine Serum(extra-special)

CCK-8細(xì)胞增殖與毒性檢測、

Quick Cell支原體快速檢測試劑盒(細(xì)胞培養(yǎng)*)

EZ Trans細(xì)胞轉(zhuǎn)染液

GelRed 核酸染料(500μL in water, 10,000 X)

EZ Protein any KD PAGE蛋白電泳試劑盒

EZ Mark彩色預(yù)染蛋白質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)

生物試劑
Blood Taq DNA聚合酶(免提取)來源于攜帶有突變的Taq DNA 聚合酶基因的E. coli 菌株,是截短后的Taq DNA聚合酶,缺失了N端的 5´結(jié)構(gòu)特異性核酸內(nèi)切酶結(jié)構(gòu)域,缺失了N端的280個氨基酸;此外其基因內(nèi)部發(fā)生了三個點(diǎn)突變。這些突變使它能夠耐受全血中存在的抑制劑, Blood Taq DNA聚合酶其他性能與常規(guī)Taq DNA聚合酶沒有較大差異。
Blood Taq DNA聚合酶(免提?。?/span> 產(chǎn)品信息

Blood Taq DNA聚合酶(免提取)

產(chǎn)品名稱

貨號

規(guī)格

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價格(元)

Blood Taq DNA聚合酶(免提?。?/span>

D1010L1179

200 tests

-20℃

550

D1010L11801000 tests-20℃

2450

產(chǎn)品描述

Blood Taq DNA聚合酶來源于攜帶有突變的Taq DNA 聚合酶基因的E. coli 菌株,是截短后的Taq DNA聚合酶,缺失了N端的 5´結(jié)構(gòu)特異性核酸內(nèi)切酶結(jié)構(gòu)域,缺失了N端的280個氨基酸;此外其基因內(nèi)部發(fā)生了三個點(diǎn)突變。這些突變使它能夠耐受全血中存在的抑制劑,  Blood Taq DNA聚合酶其他性能與常規(guī)Taq DNA聚合酶沒有較大差異。此酶能夠擴(kuò)增人和小鼠全血樣品中的DNA而無需事先提純。Blood Taq DNA聚合酶在25 µL反應(yīng)體系中能夠耐受高達(dá)20%的全血(50 µL反應(yīng)體系中耐受30%)。

Blood Taq DNA聚合酶較其他同類產(chǎn)品單位活性高,單位反應(yīng)成本低。

 

使用 Blood Taq DNA聚合酶擴(kuò)增人全血。1:5%血液+Na-EDTA;2:5%血液+K-EDTA;3:5%血液+ Na-肝素;4:5%血液+Na-檸檬酸;5:含有人干血的1mm2 FTA GutherieCard6:含有人干血的1mm2 FTA Card50 µL水洗)。

運(yùn)輸與保存方法

冰袋運(yùn)輸。收到貨后-20℃避光干燥保存,1年有效。

使用方法

1. 反應(yīng)體系配制。各組分在冰上*融化、混勻,按照下表進(jìn)行加樣:

組分

25 µL

50 µL

終濃度

5X Bloot Taq Reaction Buffer

µL

10 µL

1X

10 mM dNTP

0.5 µL

µL

0.2 mM

10 µM Forward Primer

0.75 µL

1.5 µL

0.3 µM (0.05-1 µM)

10 µM Reverse Primer

0.75 µL

1.5 µL

0.3 µM (0.05-1 µM)

Whole Blood

up to 2.5 µL*

up to 10 µL**

 

Blood Taq DNA 

µL

µL

 

Nuclease-free H2O

to 25 µL

50 µL

 

* ≤10% Recommended in 25 µL reaction volume. ** ≤=20% Recommended in 50 µL reaction volume.

2. 加血液樣品。先將其它組分用移液器上下混勻,然后將血液加在管子底部。

3. 將PCR管轉(zhuǎn)移至95°C預(yù)熱的PCR儀,開始循環(huán)。

注:若反應(yīng)體系中包含>10%的血液,*用50 µL 反應(yīng)體系。

4. PCR反應(yīng)。*PCR程序:通常為30-40個循環(huán): 

步驟

溫度

時間

Initial Denaturation

95°C

3 minutes

30-40 Cycles (Typically 35)

95°C
50-68°C
68°C

20 seconds
30 seconds
2minutes per kb 

Final Extension

68°C

10 minutes

Hold

4-10°C

 

注意事項(xiàng)

1. DNA 模板全血樣品*用肝素鈉、Na-EDTA、K-EDTA或者檸檬酸鈉處理,雖然Blood Taq DNA聚合酶可以耐受30%(v/v)的全血樣品,但為了達(dá)到*擴(kuò)增效果,5%10%為建議的理想樣品量。干血如果存放在Guthrie卡或者903卡上(Whatman, NJ),可以直接在25µL反應(yīng)體系內(nèi)加入1mm punch disc。如果血液存放在FTA paper (Whatman, NJ), 則先把 1mm punch disc50µL dH2O中,50°C條件下孵育5分鐘,然后棄去50µL dH2O,把disc 直接放入2550µL PCR 反應(yīng)體系中。

2. 引物:理想引物長度在2030個核苷酸,GC含量4060%。可用計(jì)算機(jī)軟件輔助進(jìn)行引物設(shè)計(jì),諸如PrimerSelect™(DNAStar Inc, Madison, MI)或者Primer3等軟件在引物設(shè)計(jì)和分析時均表現(xiàn)良好。每個引物在反應(yīng)體系中的終濃度為0.051μM, 0.3μM時表現(xiàn)更佳。

3. dNTPs: 每種dNTP*濃度為200 µM。

4. 冷敏感Blood Taq DNA聚合酶增加了冷敏感性,包含部分熱啟動酶(Hot Start Taq)的特點(diǎn),將反應(yīng)體系至于冰上操作,并迅速置于95°C預(yù)熱的PCR儀可以將非特異性擴(kuò)增降至zui低。 

5. 變性溫度和時間在正式開始PCR循環(huán)前,*行95°C,3分鐘的預(yù)變性,可以確保血細(xì)胞得到充分解離并釋放出DNA模板。 

6. 退火溫度和時間*退火時間持續(xù)30秒到1分鐘,退火溫度可以通過梯度PCR進(jìn)行優(yōu)化。梯度PCR時,退火起始溫度低于計(jì)算出melting temperature (Tm)5°C

       7. 延伸時間*延伸溫度為68°C,zui后的延伸程序*為10分鐘,68°C。Blood Taq DNA聚合酶延伸速度為500bp/min.

關(guān)鍵詞:移液器
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