pfu Plus DNA高保真聚合酶
產(chǎn)品名稱 | 貨號(hào) | 規(guī)格 | 保存 | 價(jià)格(元) |
pfu Plus DNA高保真聚合酶 | D1010L1174 | 250 U | -20℃ | 400 |
D1010L1175 | 500 U | -20℃ | 750 | |
D1010L1176 | 1000 U | -20℃ | 1350 |
產(chǎn)品描述
用于PCR的DNA polymerase大致可分為2大類。一類是從嗜熱菌中分離出來的被稱為polⅠ型的聚合酶,以Taq、Tth DNA polymerase為代表。另一類是從超嗜熱Archaea中分離出來的被稱為α型的聚合酶,如KOD、Pfu DNA polymerase屬于該類。α型酶具有polⅠ型酶所沒有的3'→5核酸外切酶活性。該活性被稱為Proof-reading(校正)活性,是PCR反應(yīng)高保真性的原因。
李記生物研發(fā)的Pfu Plus DNA polymerase是新一代Pfu高保真聚合酶,同時(shí)具有3’→5’外切酶活性(校對(duì)功能),和DNA擴(kuò)增高效性。Pfu-Plus DNA聚合酶的錯(cuò)誤率為0.25×10-6,比Taq DNA聚合酶低100倍,比Pfu DNA聚合酶低10倍,它能產(chǎn)生平末端PCR產(chǎn)物。Pfu-Plus DNA polymerase每kb延伸僅需要15~30秒,比KOD-Plus高保真酶快1倍,比普通Pfu 酶快4-6倍。
Pfu-Plus DNA聚合酶在擴(kuò)增長(zhǎng)度10kd以內(nèi)的DNA片段均表現(xiàn)優(yōu)異。Pfu-Plus DNA polymerase適用于點(diǎn)突變及長(zhǎng)片段或有難度的PCR應(yīng)用。
運(yùn)輸與保存方法
冰袋運(yùn)輸,收到貨后-20℃避光干燥保存,避免反復(fù)凍融,保存條件下1年有效。
使用方法
*PCR反應(yīng)體系(50 μL)
| *PCR反應(yīng)條件
注:上述建議反應(yīng)體系及反應(yīng)條件僅供參考,某些實(shí)驗(yàn)可能需要進(jìn)一步優(yōu)化以獲得*效果。 |
應(yīng)用實(shí)例
圖1:100μL反應(yīng)體系,1個(gè)單位Pfu Plus DNA聚合酶,延伸3分鐘。
lane1:4kb, lane2:1.4kb, lane3-10:7-8 kb.
圖2:100 μL反應(yīng)體系,逐級(jí)降低 Pfu-Plus DNA聚合酶用量,延伸20秒。
Lane1:20U, Lane2:10U, lane3:5U, lane4:2.5U, lane5:1.25U, lane6:0.63U, lane7:0.31U.