口蹄疫A型抗體阻斷ELISA檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫法)
使用說(shuō)明書(shū)
產(chǎn)品名稱(chēng)
通用名:口蹄疫A型抗體阻斷ELISA檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫法)
英文名:Test Kit for Antibodies to Foot and Mouth Disease Virus A(ELISA)
包裝規(guī)格 96T×1/盒(注:酶標(biāo)板不可拆)、96T×2/盒(注:酶標(biāo)板一塊可拆、一塊不可拆)
貨號(hào):E310307
預(yù)期用途
用于檢測(cè)牛、羊血清中口蹄疫A型抗體,可用于口蹄疫A型疫苗免疫效果評(píng)價(jià)。
原 理
系由預(yù)包被口蹄疫A型抗體的酶標(biāo)板、抗體工作液、抗原液酶標(biāo)記物及其他配套試劑組成,應(yīng)用阻斷酶聯(lián)免疫法(ELISA)原理檢測(cè)牛、羊血清樣本中口蹄疫A型抗體。實(shí)驗(yàn)時(shí)將稀釋的樣本與抗原液同時(shí)加入酶標(biāo)板中孵育,樣本中的抗體與酶標(biāo)板上的抗體競(jìng)爭(zhēng)抗原,阻斷抗原與板的結(jié)合;經(jīng)洗滌后,再加抗體工作液孵育;經(jīng)洗滌后加入酶標(biāo)記物孵育;再經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的酶標(biāo)記物,在孔中加底物液,與酶反應(yīng)形成藍(lán)色產(chǎn)物,顯色深淺與樣品中的特異性抗體含量成負(fù)相關(guān);加入終止液終止反應(yīng)后,產(chǎn)物變?yōu)辄S色;用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)測(cè)定各反應(yīng)孔中的吸光值,即可知樣品是否含有口蹄疫A型抗體。
試劑盒組成
序號(hào) | 名稱(chēng) | 規(guī)格(96T×1) | 規(guī)格(96T×2) |
1. | 酶標(biāo)板 | 1 | 2 |
2. | 酶標(biāo)記物 (紅蓋) | 1 | 1 |
3. | 抗體工作液 (藍(lán)蓋) | 1 | 1 |
4. | 抗原液 (黑蓋) | 1 | 1 |
5. | 洗滌液 | 1 | 2 |
6. | 底物液A (白蓋) | 1 | 1 |
7. | 底物液B (黑蓋) | 1 | 1 |
8. | 終止液 (黃蓋) | 1 | 1 |
9. | 陽(yáng)性對(duì)照 (紅蓋) | 1 | 1 |
10. | 陰性對(duì)照 (綠蓋) | 1 | 1 |
11. | 蓋板膜 | 1張 | 2張 |
12. | 自封袋 | 1個(gè) | 1個(gè) |
13. | 說(shuō)明書(shū) | 1份 | 1份 |
儲(chǔ)存及有效期
于2~8℃避光保存,有效期為12個(gè)月。
包被板開(kāi)封后請(qǐng)于2~8℃避光保存,避免受潮。使用期限為2個(gè)月。
適用儀器 含450nm、630nm波長(zhǎng)的酶標(biāo)儀,37℃恒溫設(shè)備,可調(diào)微量移液器。
樣品準(zhǔn)備
1.取動(dòng)物全血按常規(guī)方法制備血清,要求血清清亮,無(wú)溶血、無(wú)污染。樣品1周內(nèi)可于2~8℃保存,*需置-20℃保存。
2.濃縮洗滌液使用前應(yīng)恢復(fù)至室溫使沉淀溶解,然后用蒸餾水或去離子水作20倍稀釋。
3.用已稀釋的洗滌液將待檢血清按64倍稀釋?zhuān)ㄈ?μl血清加入315μl洗滌液中,混勻)。陰、陽(yáng)性對(duì)照不用稀釋。
參考值 實(shí)驗(yàn)正常的情況下,陰性對(duì)照A值≥1.0,陽(yáng)性對(duì)照A值≤50%×陰性對(duì)照A值。
檢驗(yàn)結(jié)果的解釋
1.PI(阻斷率)=(1-樣本A值/陰性對(duì)照孔平均A值)×*,PI≥50%為陽(yáng)性;PI<50%為陰性。
2.本實(shí)驗(yàn)檢測(cè)結(jié)果為陽(yáng)性時(shí)表明待檢樣本中含有口蹄疫A型抗體,且效價(jià)高于1:128,達(dá)到保護(hù)水平。
3.本實(shí)驗(yàn)檢測(cè)結(jié)果為陰性時(shí)表明待檢樣本中不含有口蹄疫A型抗體,或效價(jià)低于1:128,未達(dá)到充足保護(hù)水平。
4.如需了解樣本抗體的zui終效價(jià),可將樣本進(jìn)行梯度稀釋?zhuān)筆I≥50%的zui高稀釋比例即為該樣本抗體的zui終效價(jià)。