抗游離PSA單克隆抗體 Anti-Free-PSA McAb(coating)
特異性IgG抗體的制備
在標(biāo)記的免疫測定或其他技術(shù)中將特異性抗體純化出來,是極為重要的。例如在ELISA,用于包被的抗體一定要用特異性IgG,才能得到良好的效果。這是因為全血清中有大量非抗體蛋白,如白蛋白、α1和α2球蛋白等,如不除去,會干擾包被。再如反相間接血凝,致敏紅細(xì)胞的抗體也需用特異性IgG的I(ab')2才能使實驗滿意。特異性IgG和F(ab')2的制備方法有如下幾種。
一.粗提法提取球蛋白
大多用硫酸銨鹽析法或硫酸鈉鹽析法。硫酸銨鹽析須經(jīng)過多次沉淀,*次用40%飽和度,第二次用35%飽和度,第三次用33%飽和度,經(jīng)三次提取后的γ球蛋白基本是IgG成分。硫酸鈉法更簡便,用20%即可將γ球蛋白沉淀出來。經(jīng)鹽析后的γ球蛋白雖大多屬于IgG,但還有5%其他區(qū)帶蛋白,如γ區(qū)的雜蛋白。又因IgG組分中還含其他所謂正常的IgG,產(chǎn)生干擾。因此鹽析法粗提的γ球蛋白只能用于一般的實驗,或者是抗體效價較高的抗血清。
抗游離PSA單克隆抗體 Anti-Free-PSA McAb(coating)
二.離子交換層析法提取IgG
常用的離子交換劑有DEAE纖維素或QAE纖維素,以QAE-Sephadexzui為理想,DE22、32、52也可應(yīng)用。取QAE-SephadexA25或A50經(jīng)酸處理并在0.05mol/LpH7.5~8.6的磷酸鹽緩沖液中平衡,將水分抽干,稱濕重Ig加于10ml血清中,在室溫30min后,離心或過濾除去離子交換劑。上清液再如此處理一次,即獲得較純的IgG,甚至不含其他雜蛋白。用該技術(shù)純化IgG簡便,不損壞抗體,既可小量提取,也可大量制備。
三.親和層析法提取特異性IgG
將純化抗原或粗制抗原(如是單價特異性則對抗原要求不高)交聯(lián)Sepharose4B制成親和層析柱,將抗血清過柱后洗去未結(jié)合的雜蛋白,再用硫氰酸鉀洗脫,流出的是純的特異性IgG抗體。因硫氰酸鉀對抗體有破壞作用,應(yīng)及時透析除去。純化的IgG因含量低,失去保護(hù)作用,應(yīng)及時應(yīng)用或凍干保存,亦可20℃保存,但皆不理想;加入三乙醇胺或甘油可起保護(hù)作用。
Anti-Free-PSA McAb(coating)
四.酶解法制備F(ab')2片段
胃蛋白酶對IgG的作用點是在連接兩重鏈的二硫鍵靠C端處(232氨基酸處),結(jié)果兩
小鼠抗心磷脂抗體IgA(ACA-IgA)ELISA試劑盒 96T/48T
小鼠抗心磷脂抗體IgM(ACA-IgM)ELISA試劑盒 96T/48T
小鼠抗心磷脂抗體IgG(ACA-IgG)ELISA試劑盒 96T/48T
小鼠apelin 12(AP12)ELISA試劑盒 96T/48T
小鼠α干擾素(IFN-α)ELISA試劑盒 96T/48T
小鼠的牛血清白蛋白殘留檢測ELISA試劑盒 96T/48T
小鼠凝血因子Ⅱ(FⅡ)ELISA試劑盒 96T/48T
小鼠內(nèi)毒素(ET)ELISA試劑盒 96T/48T
小鼠過氧化物酶體增殖因子活化受體γ( PPAR-γ)ELISA試劑盒 96T/48T
小鼠環(huán)孢素A(CsA)ELISA試劑盒 96T/48T
小鼠超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)ELISA試劑盒 96T/48T
小鼠β2糖蛋白1抗體IgA/G/M(β2-GP1 IgA/G/M)ELISA試劑盒 96T/48T
小鼠抗子宮內(nèi)膜抗體(EMAb)ELISA試劑盒 96T/48T
小鼠低密度脂蛋白免疫復(fù)合物(LDL-IC)ELISA試劑盒 96T/48T
小鼠神經(jīng)膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP)ELISA試劑盒 96T/48T
小鼠抗中性粒細(xì)胞核周抗體(pANCA)ELISA試劑盒 96T/48T
小鼠15脂加氧酶(15-LO/LOX)ELISA試劑盒 96T/48T
小鼠肌鈣蛋白Ⅰ(Tn-Ⅰ)ELISA試劑盒 96T/48T
小鼠血清淀粉樣蛋白A(SAA)ELISA試劑盒 96T/48T
小鼠結(jié)合珠蛋白/觸珠蛋白(Hpt/HP)ELISA試劑盒 96T/48T
小鼠16α羥基雌酮1(16-α OHE-1)ELISA試劑盒 96T/48T
小鼠α1酸性糖蛋白(α1-AGP)ELISA試劑盒 96T/48T
小鼠內(nèi)皮型一氧化氮合成酶3(eNOS-3)ELISA試劑盒 96T/48T
小鼠膽固醇酯轉(zhuǎn)移蛋白(CETP)ELISA試劑盒 96T/48T
小鼠血管緊張素原(aGT)ELISA試劑盒 96T/48T
小鼠熱休克蛋白60(Hsp-60)ELISA試劑盒 96T/48T
小鼠丙二醛(MDA)ELISA試劑盒 96T/48T
小鼠超氧化物歧化酶(SOD)ELISA試劑盒 96T/48T
小鼠熱休克蛋白糖蛋白96(HSP gp96)ELISA試劑盒 96T/48T
小鼠血清總補體(CH50)ELISA試劑盒 96T/48T
小鼠可溶性白細(xì)胞分化抗原86(B7-2/sCD86)ELISA試劑盒 96T/48T
小鼠低氧誘導(dǎo)因子1α(HIF-1α)ELISA試劑盒 96T/48T
小鼠胰淀素(Amylin)ELISA試劑盒 96T/48T
小鼠白三烯C4(LTC4)ELISA試劑盒 96T/48T
小鼠細(xì)胞色素C(Cyt-C)ELISA試劑盒 96T/48T
小鼠血管緊張素Ⅰ(Ang-Ⅰ)ELISA試劑盒 96T/48T
小鼠黑色素細(xì)胞抗體(MC Ab)ELISA試劑盒 96T/48T
小鼠二肽基肽酶Ⅳ(DPPⅣ)ELISA試劑盒 96T/48T
小鼠過敏毒素/補體片斷4a(C4a)ELISA試劑盒 96T/48T
小鼠補體片斷5a(C5a)ELISA試劑盒 96T/48T
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小鼠卵泡抑素(FS)ELISA試劑盒 96T/48T
小鼠組織蛋白去乙酰化酶(HD)ELISA試劑盒 96T/48T
小鼠甲基化酶(Methylase)ELISA試劑盒 96T/48T
小鼠抗增殖細(xì)胞核抗原抗體(PCNA)ELISA試劑盒 96T/48T
小鼠脂蛋白脂酶(LPL)ELISA試劑盒 96T/48T
小鼠抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRACP-5b)ELISA試劑盒 96T/48T
小鼠葡萄糖依賴性胰島素釋放多肽(GIP)ELISA試劑盒 96T/48T
小鼠糖原磷酸化酶同工酶II(GP-II)ELISA試劑盒 96T/48T
小鼠糖原磷酸化酶同工酶MM(GP-MM)ELISA試劑盒 96T/48T
小鼠糖原磷酸化酶同工酶BB(GP-BB)ELISA試劑盒 96T/48T
小鼠甲狀腺素抗體(TAb)ELISA試劑盒 96T/48T
小鼠抗促甲狀腺素受體抗體(TRAb)ELISA試劑盒 96T/48T
小鼠兒茶酚胺(CA)ELISA試劑盒 96T/48T
小鼠心肌營養(yǎng)素1(CT-1)ELISA試劑盒 96T/48T
小鼠抗α-胞襯蛋白抗體IgG/IgA(α-Fodrin IgG/IgA)ELISA試劑盒 96T/48T
小鼠脂蛋白α(Lp-α)ELISA試劑盒 96T/48T
小鼠凝血因子Ⅷ相關(guān)抗原(FⅧ-Ag)ELISA試劑盒 96T/48T
小鼠凝血因子Ⅸ(FⅨ)ELISA試劑盒 96T/48T
小鼠凝血因子Ⅹ(FⅩ)ELISA試劑盒 96T/48T
小鼠血管性血友病因子/瑞斯托霉素輔因子(vWF)ELISA試劑盒 96T/48T