影響發(fā)酵過程的因素主要有以下幾個(gè)方面。
溫度 溫度對(duì)微生物的影響是多方面的。首先,溫度影響酶的活性。在zui適溫度范圍內(nèi),隨著溫度的升高,菌體生長(zhǎng)和代謝加快,發(fā)酵反應(yīng)的速率加快。當(dāng)超過zui適溫度范圍以后,隨著溫度的升高,酶很快失活,菌體衰老,發(fā)酵周期縮短,產(chǎn)量降低。溫度也能影響生物合成的途徑。例如,金色鏈霉菌在30 ℃以下時(shí),合成金霉素的能力較強(qiáng),但當(dāng)溫度超過35 ℃時(shí),則只合成四環(huán)素而不合成金霉素。此外,溫度還會(huì)影響發(fā)酵液的物理性質(zhì),以及菌種對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的分解吸收等。因此,要保證正常的發(fā)酵過程,就需維持zui適溫度。但菌體生長(zhǎng)和產(chǎn)物合成所需的zui適溫度不一定相同。如灰色鏈霉菌的zui適生長(zhǎng)溫度是37 ℃,但產(chǎn)生抗生素的zui適溫度是28 ℃。通常,必須通過實(shí)驗(yàn)來確定不同菌種各發(fā)酵階段的zui適溫度,采取分段控制。
pH pH能夠影響酶的活性,以及細(xì)胞膜的帶電荷狀況。細(xì)胞膜的帶電荷狀況如果發(fā)生變化,膜的透性也會(huì)改變,從而有可能影響微生物對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收及代謝產(chǎn)物的分泌。此外,pH還會(huì)影響培養(yǎng)基中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的分解等。因此,應(yīng)控制發(fā)酵液的pH。但不同菌種生長(zhǎng)階段和合成產(chǎn)物階段的zui適pH往往不同,需要分別加以控制。
在發(fā)酵過程中,隨著菌體對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的利用和代謝產(chǎn)物的積累,發(fā)酵液的pH必然會(huì)發(fā)生變化。如當(dāng)尿素被分解時(shí),發(fā)酵液中的NH+4濃度就會(huì)上升,pH也隨之上升。在工業(yè)生產(chǎn)上,常采用在發(fā)酵液中添加維持pH的緩沖系統(tǒng),或通過中間補(bǔ)加氨水、尿素、碳酸銨或碳酸鈣來控制pH。目前,國(guó)內(nèi)已研制出檢測(cè)發(fā)酵過程的pH電極,用于連續(xù)測(cè)定和記錄pH變化,并由pH控制器調(diào)節(jié)酸、堿的加入量。
溶解氧 氧的供應(yīng)對(duì)需氧發(fā)酵來說,是一個(gè)關(guān)鍵因素。從葡萄糖氧化的需氧量來看,1 mol的葡萄糖*氧化分解,需6 mol的氧;當(dāng)糖用于合成代謝產(chǎn)物時(shí),1 mol葡萄糖約需1.9 mol的氧。因此,好氧型微生物對(duì)氧的需要量是很大的,但在發(fā)酵過程中菌種只能利用發(fā)酵液中的溶解氧,然而氧很難溶于水。在101.32 kPa、25℃時(shí),氧在水中的溶解度為0.26 mmol/L。在同樣條件下,氧在發(fā)酵液中的溶解度僅為0.20 mmol/L,而且隨著溫度的升高,溶解度還會(huì)下降。因此,必須向發(fā)酵液中連續(xù)補(bǔ)充大量的氧,并要不斷地進(jìn)行攪拌,這樣可以提高氧在發(fā)酵液中的溶解度。
泡沫 在發(fā)酵過程中,通氣攪拌、微生物的代謝過程及培養(yǎng)基中某些成分的分解等,都有可能產(chǎn)生泡沫。發(fā)酵過程中產(chǎn)生一定數(shù)量的泡沫是正?,F(xiàn)象,但過多的持久性泡沫對(duì)發(fā)酵是不利的。因?yàn)榕菽瓡?huì)占據(jù)發(fā)酵罐的容積,影響通氣和攪拌的正常進(jìn)行,甚至導(dǎo)致代謝異常,因而必須消除泡沫。常用的消泡沫措施有兩類:一類是安裝消泡沫擋板,通過強(qiáng)烈的機(jī)械振蕩,促使泡沫破裂;另一類是使用消泡沫劑。
營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的濃度 發(fā)酵液中各種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的濃度,特別是碳氮比、無機(jī)鹽和維生素的濃度,會(huì)直接影響菌體的生長(zhǎng)和代謝產(chǎn)物的積累。如在谷氨酸發(fā)酵中,NH4+濃度的變化,會(huì)影響代謝途徑(見谷氨酸發(fā)酵)。因此,在發(fā)酵過程中,也應(yīng)根據(jù)具體情況進(jìn)行控制。