實(shí)驗(yàn)室純水超純水中微生物的污染與控制

這是我們在水機(jī)維護(hù)上經(jīng)常會(huì)遇到的問題，客戶從水機(jī)上看到的水質(zhì)，主要是指電阻率和TOC，這兩者反饋的是水中離子和有機(jī)物的含量。

這兩者我們可以通過電導(dǎo)率檢測，紫外氧化，TOC實(shí)時(shí)監(jiān)測等等方式在短時(shí)間內(nèi)確定數(shù)值，從而顯示在水機(jī)的屏幕上，讓我們可以直觀看到。但是水中還有別的污染物，比如微生物的數(shù)量，它是沒法實(shí)時(shí)在屏幕上看到的，因?yàn)槲⑸锏臋z測需要通過在合適的環(huán)境下培養(yǎng)一段時(shí)間才可測得。

目前用來制備實(shí)驗(yàn)室純化水的原水大多是市政自來水，市政自來水中含有余氯，它有效地抑制了微生物的生長。但是通過水機(jī)的純化步驟，去除余氯后水中環(huán)境發(fā)生了變化。當(dāng)漂浮在水中的微生物附著在水箱內(nèi)壁或者管道內(nèi)壁上時(shí)，按照20min分裂一次的繁殖速度，24小時(shí)內(nèi)可以分裂繁殖72次，足以在水箱壁和管壁等形成生物膜。

微生物的危害，相對于其他水中污染物，其特別之處有兩點(diǎn)：一是它具有自我繁殖能力，二還在于它們的代謝產(chǎn)物，有內(nèi)毒素、還有RNase和DNase等，造成二次污染，尤其是做分子生物學(xué)方向的客戶，一定要特別注意控制純化水中微生物的含量。

在講到微生物的控制之前，我們先了解一下水中微生物的種類和大小。微生物是指包括細(xì)菌、病毒、真菌以及一些小型的原生生物、顯微藻類等在內(nèi)的一大類生物群體。它們個(gè)體微小，譬如酵母的直徑在50µm–4µm、細(xì)菌的直徑在5µm–0.3µm、而病毒是0.3µm– 0.01µm。

雖然個(gè)體微小，可是對實(shí)驗(yàn)卻會(huì)造成可大可小的影響：

在2020版的《中國藥典》中，對純化水的微生物限度要求是不低于100CFU/mL，同時(shí)隨著藥監(jiān)局對制藥企業(yè)的監(jiān)管更加嚴(yán)格，制藥企業(yè)對自身的產(chǎn)品定位以及對應(yīng)的生產(chǎn)要求也越來越高，作為影響產(chǎn)品品質(zhì)的一個(gè)環(huán)節(jié)，微生物的限度也會(huì)更加嚴(yán)格。

國家食品藥品監(jiān)督管理總局于2014年發(fā)布了《YY/T 1244-2014 體外診斷試劑用純化水》，明確指出醫(yī)藥行業(yè)中體外診斷試劑對于使用純化水的要求。而對于生產(chǎn)有特殊要求的試劑時(shí)，其生產(chǎn)過程中對于純化水的水質(zhì)則有更高的要求，例如分子生物學(xué)試劑，除了對微生物有要求，還需要控制DNAse、RNAse以及熱原指標(biāo)。

所以2、3年沒有換耗材的水機(jī)，雖然電阻率和TOC值還在范圍內(nèi)，但微生物的含量一定是不容樂觀了。為了不影響客戶的實(shí)驗(yàn)，我們都建議及時(shí)更換耗材。

在Merck Millipore實(shí)驗(yàn)室純水超純水機(jī)中，對微生物的控制是由如下環(huán)節(jié)來完成的：

我們給客戶的建議是：

Merck Millipore IQ 70XX