詳細(xì)介紹
產(chǎn)品名稱 | 編號(hào) | 規(guī)格 | 包裝 |
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凝膠回收試劑盒GX5 | GX5 | 5 ml | |
凝膠回收試劑盒GX-50G | GX-50G | 50 ml | |
凝膠回收試劑盒GX-250G | GX-250G | 250 ml |
產(chǎn)品簡(jiǎn)介
本試劑盒采用磁珠吸附 DNA 的方法從各種瓊脂糖凝膠中提取 DNA(70bp-10kb),回收效率為 60-85%。
產(chǎn)品信息
Buffer DE-A:凝膠熔化劑,含 DNA 保護(hù)劑,防止 DNA 在高溫下降解。室溫密封儲(chǔ)存。
Beads:磁珠溶液,4℃ 密封儲(chǔ)存。
Eluent:洗脫液,室溫密封儲(chǔ)存。
操作流程
使用前準(zhǔn)備
70% 乙醇
磁性分離器(Cat.60201)
1.在紫外燈下切下含有目的DNA的瓊脂糖凝膠,用紙巾吸盡凝膠表面液體并切碎。計(jì)算凝膠重量(提前記錄EP管重量),該重量作為一個(gè)凝膠體積(如100mg=100μL 體積)。
2.加入3倍凝膠體積的buffer DE-A,混合均勻后于75℃加熱(低熔點(diǎn)瓊脂糖凝膠于40℃加熱),間斷混合(每2-3min),直至凝膠塊*熔化(約6-8min)。
3.加入0.5倍buffer DE-A體積的磁珠溶液(beads),顛倒混勻5-8次。
4.室溫放置5min,放置過(guò)程中,顛倒混勻3-5次。
5.將反應(yīng)管置于磁性分離器上靜置30s,直至磁珠全部吸附至管壁,上清澄清后,吸棄液體。
a)勿將磁珠吸出。
b)棄液體后,勿將反應(yīng)管從磁性分離器上取出。
6.加入200μL 70%乙醇,在室溫下放置30s。吸棄液體。重復(fù)操作1次。
a)勿將磁珠吸出。
b)棄液體后,勿將反應(yīng)管從磁性分離器上取出;
c)盡量吸盡管內(nèi)殘留液體
7.讓磁珠反應(yīng)管保持在磁性分離器上,室溫干燥3-5min。
a)保持反應(yīng)管置于磁性分離器上;
b)勿使磁珠過(guò)分干燥,否則將影響DNA得率
8.移去磁力架,加入30-50μL Eluent(或去離子水),用移液器吸頭輕輕吹打管壁磁珠,直至分布均勻。靜置2min。
9.將反應(yīng)管置于磁性分離器上,靜置直至磁珠全部吸附在管壁,吸取上清轉(zhuǎn)移到新的離心管中,即得到高純度的DNA。