詳細(xì)介紹
利用斑馬魚模型評(píng)價(jià)中樞神經(jīng)保護(hù)作用【評(píng)價(jià)原理】
中樞神經(jīng)損傷常表現(xiàn)為偏癱、失語(yǔ)、智力障礙或昏迷,甚至死亡。斑馬魚是一種與人類同源性較高的脊椎動(dòng)物,大腦具有典型脊椎動(dòng)物腦部形態(tài)學(xué)特征,髓鞘結(jié)構(gòu)特征和少突膠質(zhì)細(xì)胞分化過(guò)程與哺乳動(dòng)物高度一致。而且斑馬魚生長(zhǎng)發(fā)育周期短,神經(jīng)系統(tǒng)簡(jiǎn)單,有利于開(kāi)展中樞神經(jīng)保護(hù)劑的研究。霉酚酸嗎啉乙酯可以抑制斑馬魚神經(jīng)元軸突的生長(zhǎng),干擾神經(jīng)及細(xì)胞的遷移和導(dǎo)致發(fā)育畸形,使神經(jīng)元細(xì)胞凋亡。
經(jīng)過(guò)特異性熒光染色(凋亡細(xì)胞呈綠色),中樞神經(jīng)損傷的斑馬魚在腦和脊髓部位會(huì)布滿凋亡細(xì)胞,比正常斑馬魚多很多,可以明顯被觀察到。
利用斑馬魚模型評(píng)價(jià)中樞神經(jīng)保護(hù)作用【實(shí)驗(yàn)方案】
我們將受測(cè)試斑馬魚分成三組,分別是正常對(duì)照組、模型對(duì)照組和服用中樞神經(jīng)保護(hù)劑組。其中正常對(duì)照組未經(jīng)任何處理,模型對(duì)照組與服用中樞神經(jīng)保護(hù)劑組都攝入了等量的霉酚酸嗎啉乙酯(霉酚酸嗎啉乙酯通過(guò)溶解到養(yǎng)魚用水中的方式攝入到斑馬魚體內(nèi))。服用中樞神經(jīng)保護(hù)劑組在攝入霉酚酸嗎啉乙酯的同時(shí)攝入還原型谷胱甘肽、養(yǎng)血清腦顆粒和安宮牛黃丸之類的中樞神經(jīng)保護(hù)劑。
服用中樞神經(jīng)保護(hù)劑一段時(shí)間后,我們對(duì)斑馬魚整體進(jìn)行特異性熒光染色,觀察中樞神經(jīng)細(xì)胞的凋亡情況。
【結(jié)果展示】
圖1. 斑馬魚中樞神經(jīng)保護(hù)表型圖
黃色虛線區(qū)域?yàn)橹袠猩窠?jīng),綠色光點(diǎn)為凋亡細(xì)胞
可以看到,服用中樞神經(jīng)保護(hù)劑組的中樞神經(jīng)情況與正常對(duì)照組比較相似,沒(méi)有明顯的細(xì)胞凋亡。
【評(píng)價(jià)結(jié)論】
1.經(jīng)過(guò)每組30尾斑馬魚的對(duì)比實(shí)驗(yàn),服用中樞神經(jīng)保護(hù)劑組的中樞神經(jīng)情況與正常對(duì)照組相似,并未出現(xiàn)模型對(duì)照組大量凋亡細(xì)胞的情況。
2.本實(shí)驗(yàn)證實(shí)了還原型谷胱甘肽、養(yǎng)血清腦顆粒和安宮牛黃丸具有明顯保護(hù)中樞神經(jīng)作用。