詳細(xì)介紹
利用斑馬魚模型評價(jià)改善貧血功效【評價(jià)原理】
貧血是指人體外周血紅細(xì)胞容量減少,低于正常范圍下限的一種常見的臨床癥狀。斑馬魚造血系統(tǒng)的形成,包括紅系、髓系、淋系及巨核系為主的造血系統(tǒng),其相關(guān)的轉(zhuǎn)錄因子及信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路同人類有高度的同源性,這些特點(diǎn)使斑馬魚在人類造血系統(tǒng)和血液疾病的研究中有著更加廣泛的應(yīng)用。由于斑馬魚早期出現(xiàn)血液循環(huán)時(shí)胚胎透明,可通過染色劑在顯微鏡直接觀察心臟紅細(xì)胞的數(shù)量。
苯肼導(dǎo)致紅細(xì)胞外翻和氧化應(yīng)激產(chǎn)生,紅細(xì)胞外翻能夠引起血細(xì)胞聚集,氧化應(yīng)激產(chǎn)生導(dǎo)致內(nèi)皮細(xì)胞損傷,進(jìn)而導(dǎo)致血小板聚集、纖維蛋白原形成,終誘導(dǎo)血栓發(fā)生。
用特異性紅細(xì)胞染色劑(呈紅色),貧血斑馬魚心臟部位的紅細(xì)胞較正常斑馬魚明顯減少,在解剖顯微鏡下可以觀察到。
利用斑馬魚模型評價(jià)改善貧血功效【實(shí)驗(yàn)方案】
我們將受測試斑馬魚分成三組,分別是正常對照組、模型對照組和服用補(bǔ)血藥物組。其中正常對照組未經(jīng)任何處理,模型對照組與服用補(bǔ)血藥物組都攝入了等量的苯肼(苯肼通過溶解到養(yǎng)魚用水中的方式攝入到斑馬魚體內(nèi))。服用補(bǔ)血藥物組先攝入生血寧之類的改善貧血藥物后再攝入苯肼。
服用改善貧血藥物一段時(shí)間后,再加入苯肼共同處理一段時(shí)間后,我們對斑馬魚整體做紅細(xì)胞特異性染色,終分析斑馬魚的紅細(xì)胞信號強(qiáng)度。
【結(jié)果展示】
圖1. 斑馬魚貧血表型圖
可以看到,模型對照組紅細(xì)胞信號強(qiáng)度較正常對照組明顯減少,服用補(bǔ)血藥物組的紅細(xì)胞信號強(qiáng)度與正常對照組比較相似,沒有明顯的紅細(xì)胞減少情況。
【評價(jià)結(jié)論】
1.經(jīng)過每組30尾斑馬魚的對比實(shí)驗(yàn),服用補(bǔ)血藥物組的紅細(xì)胞信號強(qiáng)度與正常對照組相似,并未出現(xiàn)模型對照組紅細(xì)胞減少的情況。
2.本實(shí)驗(yàn)證實(shí)了生血寧具有明顯改善貧血的功效。