利用斑馬魚(yú)模型評(píng)價(jià)促進(jìn)血管再生作用

利用斑馬魚(yú)模型評(píng)價(jià)促進(jìn)血管再生作用【評(píng)價(jià)結(jié)論】
1.經(jīng)過(guò)每組30尾斑馬魚(yú)的對(duì)比實(shí)驗(yàn)，服用血管再生促進(jìn)劑的腸下血管面積和血管分支均與正常對(duì)照組比較相似，并未模型對(duì)照組腸下血管面積縮小、血管分支減少的情況。
2.本實(shí)驗(yàn)證實(shí)了黃芪甲苷具有促進(jìn)血管再生作用。

利用斑馬魚(yú)模型評(píng)價(jià)促進(jìn)血管再生作用【評(píng)價(jià)原理】

血管新生是指在已有血管結(jié)構(gòu)的基礎(chǔ)上長(zhǎng)出新血管的生物學(xué)過(guò)程，是一個(gè)涉及多種細(xì)胞、基質(zhì)及細(xì)胞因子的復(fù)雜過(guò)程。其中血管內(nèi)皮細(xì)胞是循環(huán)血液與血管平滑肌的機(jī)械屏障，在缺血性疾病的治療中，促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞的增殖，重建缺血區(qū)微循環(huán)，促進(jìn)血管新生是重要的治療手段之一。羥甲基戊二酸單酰輔酶還原酶 ( HMGCR) 是他汀類藥物發(fā)揮抑制作用的直接作用點(diǎn), HMGCR功能被抑制會(huì)影響血管的完整性和穩(wěn)定性。斑馬魚(yú)在發(fā)育起始階段，存活不依賴血液循環(huán)，不會(huì)像哺乳動(dòng)物那樣由于循環(huán)缺失導(dǎo)致胚胎死亡。因此，可用辛伐他汀誘導(dǎo)斑馬魚(yú)血管缺失模型從而篩選血管再生促進(jìn)劑。

運(yùn)用轉(zhuǎn)基因血管內(nèi)皮熒光斑馬魚(yú)（呈綠色），血管缺失的斑馬魚(yú)腸下血管面積較正常斑馬魚(yú)腸下血管面積減小且腸下血管分支變少。由于轉(zhuǎn)基因斑馬魚(yú)的特點(diǎn)，血管的變化可以明顯被觀察到。

利用斑馬魚(yú)模型評(píng)價(jià)促進(jìn)血管再生作用【實(shí)驗(yàn)方案】

我們將受測(cè)試斑馬魚(yú)分成三組，分別是正常對(duì)照組、模型對(duì)照組和攝入血管再生促進(jìn)劑組。其中正常對(duì)照組未攝入辛伐他汀，模型對(duì)照組與攝入血管再生促進(jìn)劑組都攝入等量的辛伐他?。ㄐ练ニ⊥ㄟ^(guò)溶解到養(yǎng)魚(yú)用水中的方式攝入到斑馬魚(yú)體內(nèi)）。攝入血管再生促進(jìn)劑組在攝入辛伐他汀后攝入黃芪甲苷之類的血管再生促進(jìn)劑。

服用一段時(shí)間血管再生促進(jìn)劑后，我們對(duì)斑馬魚(yú)進(jìn)行熒光拍照，觀察斑馬魚(yú)腸下血管面積和腸下血管分支的變化。

【結(jié)果展示】

圖1. 腸下血管面積表型圖

黃色虛線區(qū)域?yàn)榘唏R魚(yú)腸下血管面積

可以看到，服用血管再生促進(jìn)劑組腸下血管面積與未攝入辛伐他汀的正常對(duì)照組比較相似，沒(méi)有明顯的血管缺失。

圖2. 腸下血管分支表型圖

白色箭頭所指為斑馬魚(yú)腸下血管分支數(shù)

可以看到，服用血管再生促進(jìn)劑組腸下血管分支與未攝入辛伐他汀的正常對(duì)照組比較相似，沒(méi)有明顯的血管缺失。

【評(píng)價(jià)結(jié)論】

1.經(jīng)過(guò)每組30尾斑馬魚(yú)的對(duì)比實(shí)驗(yàn)，服用血管再生促進(jìn)劑的腸下血管面積和血管分支均與正常對(duì)照組比較相似，并未模型對(duì)照組腸下血管面積縮小、血管分支減少的情況。

2.本實(shí)驗(yàn)證實(shí)了黃芪甲苷具有促進(jìn)血管再生作用。