詳細介紹
利用斑馬魚模型評價對caspase的誘導作用【評價原理】
Caspase家族在細胞凋亡的調(diào)控上起著重要的作用。Caspase分為三大類:凋亡啟動因子、凋亡執(zhí)行因子和炎癥介導因子。凋亡啟動因子在級聯(lián)反應(yīng)的上游,包括(Caspase-8和Caspase-9)等,能識別和激活下游的Caspase。Caspase-9參與線粒體途徑介導的細胞凋亡。凋亡執(zhí)行因子在級聯(lián)反應(yīng)的下游,包括Caspase-3和Caspase-7等,作用于其特異性底物并導致細胞凋亡。Caspase-3是Caspase家族中的,重要的凋亡執(zhí)行者之一,大多數(shù)引發(fā)細胞凋亡的因素,終均需要通過caspase-3介導的信號傳遞途徑,它的活化是凋亡進入不可逆階段的標志。
我們評價斑馬魚對caspase的誘導作用有3個指標:1.對caspase 3的誘導作用;2.對caspase 8的誘導作用;3.對caspase 9的誘導作用。
利用斑馬魚模型評價對caspase的誘導作用【實驗方案】
我們將受測試斑馬魚分成兩組,分別是正常對照和供服用/注射試品組(供試品通過溶解到養(yǎng)魚用水中或注射的方式攝入到斑馬魚體內(nèi))。
服用/注射供試品一段時間后,利用特異性試劑盒檢測斑馬魚體內(nèi)caspase的活性。
【結(jié)果展示】
圖1. 斑馬魚caspase3活性
與正常對照組比較,*** p < 0.001
圖2. 斑馬魚caspase8活性
與正常對照組比較,*** p < 0.001
圖3. 斑馬魚caspase9活性
與正常對照組比較,*** p < 0.001
可以看到,服用/注射供試品組與正常對照組比較caspase活性明顯上升。
【評價結(jié)論】
1.經(jīng)過每組30尾斑馬魚的對比實驗,服用/注射供試品組的斑馬魚caspase活性明顯上升,與正常對照組存在明顯的差別。
2.本實驗證實了該供試品對斑馬魚caspase有誘導作用。