詳細(xì)介紹
利用斑馬魚(yú)模型評(píng)價(jià)Wnt信號(hào)通路抑制作用【評(píng)價(jià)原理】
Wnt是一種分泌的糖蛋白,發(fā)育調(diào)控的的wnt基因編碼分泌的糖基化蛋白質(zhì),作用于細(xì)胞表面,大多數(shù)的wnt基因在機(jī)體傷口修復(fù)和再生需要組成受傷組織的各種細(xì)胞類(lèi)型之間做協(xié)調(diào)。
利用斑馬魚(yú)模型評(píng)價(jià)Wnt信號(hào)通路抑制作用【實(shí)驗(yàn)方案】
我們將受測(cè)試斑馬魚(yú)分為體軸發(fā)育和斷尾再生兩種模型。
體軸發(fā)育評(píng)價(jià)分成兩組,分別是正常對(duì)照組和服用Wnt信號(hào)通路抑制劑組(Wnt信號(hào)通路抑制劑LGK974通過(guò)溶解到養(yǎng)魚(yú)用水中的方式攝入到斑馬魚(yú)體內(nèi))。服用一段時(shí)間Wnt信號(hào)通路抑制劑后,對(duì)斑馬魚(yú)體軸長(zhǎng)度進(jìn)行測(cè)量,觀察體軸長(zhǎng)度的變化。
斷尾再生評(píng)價(jià)分成三組,分別是正常對(duì)照組、模型對(duì)照組和服用Wnt信號(hào)通路抑制劑組(Wnt信號(hào)通路抑制劑LGK974通過(guò)溶解到養(yǎng)魚(yú)用水中的方式攝入到斑馬魚(yú)體內(nèi))。服用一段時(shí)間Wnt信號(hào)通路抑制劑后,對(duì)斑馬魚(yú)尾鰭面積進(jìn)行測(cè)量,觀察尾鰭再生的變化。
【結(jié)果展示】
圖1. 斑馬魚(yú)體軸發(fā)育表型圖
黑色箭頭所指為缺失的尾鰭
可以看到,服用Wnt信號(hào)通路抑制劑組的體軸長(zhǎng)度較正常對(duì)照組明顯變短。
圖2. 斑馬魚(yú)尾鰭再生表型圖
紅色區(qū)域?yàn)橄蛭馋捲偕课?/p>
可以看到,服用Wnt信號(hào)通路抑制劑組的斑馬魚(yú)尾鰭再生面積相比模型對(duì)照組明顯變小。
【評(píng)價(jià)結(jié)論】
1.經(jīng)過(guò)每組30尾斑馬魚(yú)的對(duì)比實(shí)驗(yàn),服用Wnt信號(hào)通路抑制劑的體軸長(zhǎng)度和尾鰭再生面積均小于正常對(duì)照組。
2.本實(shí)驗(yàn)證實(shí)了LGK974具有體軸發(fā)育和組織再生抑制作用,作用機(jī)制與抑制wnt信號(hào)通路相關(guān)。