詳細介紹
利用斑馬魚模型評價強健骨骼功效【評價原理】
斑馬魚的骨骼看似與人類差別明顯,實際上它的生長發(fā)育過程和調控機制與哺乳動物高度相似。而且斑馬魚骨骼發(fā)育迅速,適合快速建立骨骼疾病模型。在大量攝入糖皮質激素(以潑尼松為例)后,斑馬魚會出現(xiàn)繼發(fā)性骨質疏松。
骨密度幾乎由骨骼中鈣含量來反映,應用特異性地結合鈣的熒光染料染色(呈綠色),用其熒光強度可反映骨密度。斑馬魚骨骼染色后經熒光顯微鏡采集到的熒光強度能夠客觀反映骨密度。
利用斑馬魚模型評價強健骨骼功效【實驗方案】
我們將測試斑馬魚分成三組,分別是正常對照組、模型對照組和服用強健骨骼產品組。其中正常對照組未加入潑尼松,模型對照組與服用強健骨骼產品組加入了等量的潑尼松(潑尼松通過溶解到養(yǎng)魚用水中的方式攝入到斑馬魚體內)。服用強健骨骼產品組在加入潑尼松的同時加入碳酸鈣、維生素之類的強健骨骼產品。
服用一段時間強健骨骼產品后,我們對斑馬魚整體做鈣黃綠素染色,觀察脊椎骨熒光強度。
【結果展示】
圖1. 斑馬魚脊椎骨表型圖
黃色虛線區(qū)域為脊椎骨
可以看到,服用強健骨骼產品的脊椎骨骨密度與正常對照組比較相似,沒有明顯的骨質疏松。
【評價結論】
1. 經過每組30尾斑馬魚的對比實驗,服用強健骨骼產品組的骨密度與未經潑尼松處理的正常對照組相似,并未出現(xiàn)模型對照組的骨質疏松的情況。
2. 本實驗證實了碳酸鈣、維生素具有顯著的強健骨骼功效。