中成藥及其提取物的安全性評(píng)價(jià)，是藥物后續(xù)開(kāi)發(fā)過(guò)程中的關(guān)鍵環(huán)節(jié)之一。基礎(chǔ)研究證實(shí)，中華跌打丸具有消腫止痛、舒筋活絡(luò)、止血生肌、活血祛瘀、挫傷筋骨、新舊瘀痛、創(chuàng)傷出血、風(fēng)濕瘀痛的炎癥反應(yīng)作用。目前，鬼畫符作為中華跌打丸 32 味藥材之一，其物質(zhì)基礎(chǔ)與藥效機(jī)制研究尚不明確，迫切需要采用現(xiàn)代研究手段進(jìn)一步完善其功效評(píng)價(jià)，以便為鬼畫符的開(kāi)發(fā)應(yīng)用和闡述中華跌打丸的藥理藥效提供科學(xué)依據(jù)。

  日前，由環(huán)特生物與廣西中恒創(chuàng)新醫(yī)藥研究有限公司科研團(tuán)隊(duì)聯(lián)合發(fā)表研究論文——《中華跌打丸及其藥材鬼畫符提取物的抗炎作用評(píng)價(jià)》，這是環(huán)特生物發(fā)布的第100篇期刊研究論文！

一、引言

中華跌打丸為廣西梧州制藥（集團(tuán)）股份有限公司生產(chǎn)的產(chǎn)品，主要應(yīng)用于消腫止痛、舒筋活絡(luò)、止血生肌、活血祛瘀、挫傷筋骨、新舊瘀痛、創(chuàng)傷出血、風(fēng)濕瘀痛。鬼畫符作為中華跌打丸32味藥材之一，為大戟科（Euphorbiaceae）黑面神屬植物黑面神 Breynia fruticosa(L.) Hook. f. 的干燥全株，分布于浙江、福建、廣東、海南、廣西、貴州、云南等地。其味微苦，性涼，有小毒，歸脾、胃經(jīng)，具有清濕熱、化瘀滯的功效。常用于治療腹痛吐瀉、疔毒、瘡癤、濕疹、皮炎、漆瘡、鶴膝風(fēng)、跌打腫痛。廣東和廣西地區(qū)用其治療支氣管炎，具有良好的療效。

目前，鬼畫符的物質(zhì)基礎(chǔ)與藥效機(jī)制研究尚不明確，迫切需要采用現(xiàn)代研究手段進(jìn)一步完善其功效評(píng)價(jià)。斑馬魚是一種脊椎動(dòng)物，與人類基因同源性高達(dá) 87%，可運(yùn)用于動(dòng)物實(shí)驗(yàn)且實(shí)驗(yàn)結(jié)果在人體適用性較高，是理想的模式生物。故本研究采用硫酸銅誘導(dǎo)建立轉(zhuǎn)基因中性粒細(xì)胞熒光斑馬魚炎癥模型對(duì)中華跌打丸與鬼畫符各提取物進(jìn)行抗炎作用評(píng)價(jià)，旨在進(jìn)一步明確鬼畫符和中華跌打丸抗炎作用的藥效物質(zhì)基礎(chǔ)，為鬼畫符的開(kāi)發(fā)應(yīng)用和闡述中華跌打丸的藥理藥效提供科學(xué)依據(jù)。

二、實(shí)驗(yàn)結(jié)果

模型對(duì)照組斑馬魚炎癥部位中性粒細(xì)胞數(shù) 18 個(gè)，與正常對(duì)照組（4 個(gè)）比較 P＜0.001，顯示硫酸銅誘發(fā)斑馬魚炎癥模型成功。80 µM 吲哚美辛組斑馬魚炎癥部位中性粒細(xì)胞數(shù) 11個(gè)，與模型對(duì)照組比較 P＜0.001，其炎癥消退作用為 39%，說(shuō)明吲哚美辛對(duì)炎癥斑馬魚有明顯抗炎作用。

中華跌打丸濃度為 222 µg/mL、667 µg/mL 和 2000 µg/mL時(shí)，斑馬魚炎癥部位中性粒細(xì)胞數(shù)分別為 10 個(gè)、6 個(gè)和 3 個(gè)，與模型對(duì)照組（18 個(gè)）比較 P 均＜0.001，其炎癥消退作用分別為 44%、67%和 83%，說(shuō)明中華跌打丸在本實(shí)驗(yàn)濃度條件下對(duì)炎癥斑馬魚有明顯抗炎作用。

鬼畫符95%乙醇提取物濃度為28 µg/mL、83 µg/mL和250 µg/mL 時(shí)，斑馬魚炎癥部位中性粒細(xì)胞數(shù)分別為 10 個(gè)、6 個(gè) 和 5 個(gè)，與模型對(duì)照組（18 個(gè)）比較 P 均＜0.001，其炎癥消退作用分別為 44%、67%和 72%，說(shuō)明鬼畫符 95 乙醇提取物在本實(shí)驗(yàn)濃度條件下對(duì)炎癥斑馬魚有明顯抗炎作用。

鬼畫符 50%乙醇提取物的濃度為 3.47 µg/mL、10.42 µg/mL和 31.25 µg/mL 時(shí)，斑馬魚炎癥部位中性粒細(xì)胞數(shù)分別為15 個(gè)、11 個(gè)和 8 個(gè)，與模型對(duì)照組（18 個(gè)）比較 P＜0.05 &P＜0.001&P＜0.001，其炎癥消退作用分別為 17%、39%和56%，說(shuō)明鬼畫符 50%乙醇提取物在本實(shí)驗(yàn)濃度條件下對(duì)炎癥斑馬魚有明顯抗炎作用。

鬼畫符水提取物濃度為14 µg/mL、42 µg/mL和125 µg/mL時(shí)，斑馬魚炎癥部位中性粒細(xì)胞數(shù)分別為 9 個(gè)、9 個(gè)和 5 個(gè)，與模型對(duì)照組（18 個(gè)）比較 P 均＜0.001，其炎癥消退作用分別為 50%、50%和 72%，說(shuō)明鬼畫符水提取物在本實(shí)驗(yàn)濃度條件下對(duì)炎癥斑馬魚有明顯抗炎作用。

鬼畫符水、50%乙醇、95%乙醇混合物濃度為 28 µg/mL、83 µg/mL 和 250 µg/mL 時(shí)，斑馬魚炎癥部位中性粒細(xì)胞數(shù)分別為 12 個(gè)、7 個(gè)和 6 個(gè)，與模型對(duì)照組（18 個(gè)）比較 P 均＜0.001，其炎癥消退作用分別為 33%、61%和 67%，說(shuō)明鬼畫符水、50 乙醇、95 乙醇混合物在本實(shí)驗(yàn)濃度條件下對(duì)炎癥斑馬魚有明顯抗炎作用。詳見(jiàn)圖 1、圖 2 和表 2。

三、實(shí)驗(yàn)結(jié)論

本實(shí)驗(yàn)組已對(duì)中華跌打丸及鬼畫符各提取物炎癥斑馬魚測(cè)定濃度（MTC）進(jìn)行測(cè)定，根據(jù)各實(shí)驗(yàn)組的斑馬魚死亡數(shù)量與毒性情況得到中華跌打丸、鬼畫符 95%乙醇提取物、鬼畫符 50%乙醇提取物、鬼畫符水提取物和鬼畫符水、50%乙醇、95%乙醇混合提取物的 MTC 分別為 2000 µg/mL、250 µg/mL、31.25 µg/mL、125 µg/mL、250 µg/mL，分別選取各實(shí)驗(yàn)組 1/9、1/3 和 1/1 的 MTC 濃度作為中和跌打丸及鬼畫符提取物對(duì)硫酸銅誘導(dǎo)炎癥模型斑馬魚抗炎作用評(píng)價(jià)的實(shí)驗(yàn)濃度。

實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，中華跌打丸和鬼畫符各提取物對(duì)硫酸銅誘導(dǎo)的炎癥斑馬魚均表現(xiàn)出顯著的抗炎作用，且均呈劑量依賴性。與吲哚美辛陽(yáng)性對(duì)照組相較，除鬼畫符 50%乙醇提取物 3.47 µg/mL 濃度組外，其余各組對(duì)炎癥斑馬魚的抗炎作用更佳，推測(cè)鬼畫符藥材可能是中華跌打丸抗炎作用的主要成分之一。

由于中華跌打丸組方藥味數(shù)眾多，后續(xù)還需進(jìn)一步開(kāi)展其他藥材的抗炎作用評(píng)價(jià)研究，以明確中華跌打丸抗炎作用的藥效物質(zhì)基礎(chǔ)，為臨床應(yīng)用提供理論基礎(chǔ)。