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CloneJET PCR 克隆試劑盒

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產(chǎn)品型號Thermo Scientific

品       牌

廠商性質(zhì)生產(chǎn)商

所  在  地

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更新時間:2024-08-09 07:25:17瀏覽次數(shù):117次

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經(jīng)營模式:生產(chǎn)廠家

商鋪產(chǎn)品:1324條

所在地區(qū):上海上海市

聯(lián)系人:Tracy (市場)

產(chǎn)品簡介

CloneJET PCR 克隆試劑盒

詳細介紹

Thermo Scientific CloneJET PCR 克隆試劑盒也可用于 DH10B 細胞 (K123120),是一款的陽性選擇系統(tǒng),可高效克隆由任何熱穩(wěn)定 DNA 聚合酶生成的 PCR 產(chǎn)物。也可以克隆任何其他的鈍性或黏性末端DNA片段。其非常適用于磷酸化或非磷酸化DNA片段。只需 5 分鐘即可連接至所包含的陽性分選載體,并產(chǎn)生超過 99% 的重組克隆。將由校正酶生成的平末端 PCR 產(chǎn)物直接接入克隆載體。

在連接前 5 分鐘內(nèi)使用試劑盒提供的熱穩(wěn)定 DNA 平末端化酶將由非校正 DNA 聚合酶或 DNA 聚合酶混合物生成的 PCR 產(chǎn)物處理成平末端。所有常見的實驗室大腸桿菌菌株都可以使用連接產(chǎn)物直接進行轉(zhuǎn)化。

特點

CloneJET PCR 克隆試劑盒中包含一種新的即用型陽性選擇克隆載體 pJET1.2/blunt。該載體中有一個致命型限制性酶基因,此基因在 DNA 插入片段接入克隆位點后即被破壞。因此,只有含重組質(zhì)粒的細菌細胞才能形成菌落。不含插入片段的再循環(huán) pJET1.2/blunt 載體分子會表達致死性限制性內(nèi)切酶,繼而在轉(zhuǎn)化后殺死宿主大腸桿菌細胞。此陽性選擇大大加快了菌落篩選的進程,節(jié)省了藍白斑篩選所需的額外成本。

為了便于對插入片段進行映射和處理,pJET1.2/blunt 克隆載體的多克隆位點包含兩個 BglII 識別序列,位于插入位點兩側(cè)。此外,載體含有用于體外體內(nèi)轉(zhuǎn)錄以及插入片段測序的 T7 啟動子。

產(chǎn)品優(yōu)勢

快速—在僅 5 分鐘內(nèi)完成 PCR 克隆
較高效率–>99% 陽性克隆
無克隆背景—陽性選擇載體
多用途—是平末端或黏性末端克隆的理想選擇
經(jīng)濟—無需進行昂貴的藍白斑篩選

應(yīng)用

•克隆高達 10 kb 的平末端或 '3-dA 尾 PCR 產(chǎn)物
•克隆限制性內(nèi)切酶生成的 DNA 片段
•克隆 DNA 測序
從 T7 啟動子體外和體內(nèi)轉(zhuǎn)錄克隆插入片段

包括

•pJET1.2/blunt 克隆載體
• T4 DNA 連接酶
• 2X 反應(yīng)緩沖液
• DNA 平末端化酶
• pJET1.2 正向測序引物 (5'-CGACTCACTATAGGGAGAGCGGC-3')
• pJET1.2 反向測序引物 (5'-AAGAACATCGATTTTCCATGGCAG-3')
• 對照 PCR 產(chǎn)物
• 無核酸酶水
•詳細方案

電穿孔前,始終使用 GeneJET PCR 純化試劑盒 #K0701 對連接混合物進行柱純化或使用氯仿進行提取?;旌衔镏写嬖诘鞍踪|(zhì)和鹽分會抑制電穿孔。

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