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緩沖液的配制指南
閱讀:1502 發(fā)布時(shí)間:2023-7-31在日??蒲兄校?常使用到的一種液體就是緩沖液。什么是緩沖液?
緩沖液(Buffer solution)通常是由「弱酸及其共軛堿」或「弱堿及其共軛酸」緩沖對所組成的溶液,能夠在加入一定量其他物質(zhì)時(shí)減緩pH的改變。以生物實(shí)驗(yàn)中zui常用的一種緩沖液PBS為例,是由Na2HPO4、KH2PO4組成的緩沖對,在PH5.8-8.0范圍內(nèi)有較強(qiáng)的緩沖能力。
緩沖液如何使用呢?又該如何配制緩沖液?
為了保證緩沖液有足夠強(qiáng)的緩沖能力,在配制緩沖溶液時(shí),需要做到:
為使共軛酸堿對的濃度比接近于1,應(yīng)根據(jù)所需要維持的pH范圍選擇合適的緩沖對,使其中的弱酸的pKa等于或接近于所要求的pH。
例如,生物培養(yǎng)液中需用PH=7.0的緩沖溶液,已知H2PO4-的pKa2=7.21,因此,H2PO4—HPO42-是可以選擇的合適的緩沖對。如若配制PH=9.0的緩沖溶液,則可選擇NH3·H2O-NH4Cl緩沖對(pKa(NH4+)=9.25)。
可見弱酸的Ka是選擇緩沖溶液的主要依據(jù),表中列出了幾種常用的緩沖溶液。
常見的水溶性緩沖液有Tris,Tris-HCl 緩沖液、、HEPES 緩沖液,需要那種,聯(lián)系AVT,了解更多制劑干貨。