土壤微量元素有效硼的應(yīng)用方案(姜黃素比色法)
引言
科學(xué)研究和生產(chǎn)實踐證明微量元素為有機(jī)體正常生命活動所必需,在有機(jī)體的生活中起著重要作用。土壤和植物中的微量元素都很低，并且這些微量元素在植物體中的缺乏量、適量及致毒量范圍很窄，因此微量元素的分析測定工作較常量元素要求更加嚴(yán)格。
關(guān)鍵詞 土壤 有效硼 比色
原理
土樣經(jīng)沸水浸提5分鐘，浸出液中的硼用姜黃素比色法測定。姜黃素是由姜中提取的黃色色素，以酮型和稀醇型存在，姜黃素不溶于水，但能溶于甲醇、酒精、丙酮和冰醋酸中而呈黃色，在酸性介質(zhì)中與B結(jié)合成玫瑰紅色的絡(luò)合物，即玫瑰花青苷。它是兩個姜黃素分子和一個B原子絡(luò)合而成，檢出B的靈敏度是所有比色測定硼的試劑中最gao的(摩爾吸收系數(shù)E sso=1.80×10')最da吸收峰在550nm處。在比色測定B時應(yīng)嚴(yán)格控制顯色條件，以保證玫瑰花青苷的形成。玫瑰花青苷溶液在0.0014—0.06mg/LB的濃度范圍內(nèi)符合Beer定律。溶于酒精后，在室溫下1—2小時內(nèi)穩(wěn)定。
儀器及試劑
美析UV-1800紫外分光光度計;
石英(或其他無硼玻璃);三角瓶(250或300ml)和容量瓶(100ml, 1000ml);
回流裝置;離心機(jī);瓷蒸發(fā)皿(7.5cm);恒溫水浴;電子天平(1/100)。
試劑
(1)95%酒精(二級);(2)*(二級);
(3)姜黃素—草酸溶液:稱取0.04g 姜黃素和5g草酸，溶于*(二級)中，加入4.2ml6mol/LHCl,移入100ml石英容量瓶中，用酒精定容。貯存在陰涼的地方。姜黃素容易分解，最hao當(dāng)天配制。如放在冰箱中，有效期可延長至3—4天。
(4)B標(biāo)準(zhǔn)系列溶液:稱取0.5716gH3BO3(一級)溶于水，在石英容量瓶中定容成1升。此為100mg/LB標(biāo)準(zhǔn)溶液，再稀釋10倍成為10mg/LB標(biāo)準(zhǔn)貯備溶液。吸取10mg/LB溶液1.0,2.0,3.0,4.0,5.0ml,用水定容至.50ml,成為0.2，0.4，0.6，0.8，1.0mg/LB的標(biāo)準(zhǔn)系列溶液，貯存在塑料試劑瓶中。
(5)1mol/LCaCl溶液:稱取7.4gCaCl·2H2O(二級)溶于100ml水中。
操作步驟
待測液制備
稱取風(fēng)干土壤(通過1mm尼龍篩)10.00g于 250ml或300ml的石英三角瓶(或塑料瓶)中，加20.0ml無硼水。連接回流冷凝器后煮沸5分鐘整，立即?；?，但繼續(xù)使冷卻水流動。稍冷后取下石英三角瓶。放置片刻使之冷卻。倒入離心管中,加2滴1mol/LCaCl,溶液以加速澄清(但不要多加)，離心分離出清液(或過濾到塑料杯中)。
測定
吸取1.00ml清液，放入瓷蒸發(fā)皿中，加入4ml姜黃素溶液。在55±3℃的水浴上蒸發(fā)至干，并且繼續(xù)在水浴上烘干15分鐘除去殘存的水分。在蒸發(fā)與烘干過程中顯出紅色，加20.0ml95%酒精溶解，用干濾紙過濾到1cm光徑比色槽中，在550nm波長處比色，用酒精調(diào)節(jié)比色計的零點。假若吸收值過大，說明B濃度過高，應(yīng)加95%酒精稀釋或改用580或600nm的波長比色。
工作曲線的繪制
分別吸取0.2，0.4，0.6，0.8，1.0mg/LB標(biāo)準(zhǔn)系列溶液各1ml放入瓷蒸發(fā)皿中，加4ml姜黃素溶液，按上述步驟顯色和比色。以B標(biāo)準(zhǔn)系列的濃度mg/L對應(yīng)吸收值繪制工作曲線。
結(jié)果計算
有效B,mg/L=C×液土比
式中C一由工作曲線查得B的mg/L數(shù);
液土比一浸提時，浸提劑毫升數(shù)/土壤克數(shù)。
關(guān)于美析
美析主營光譜類儀器：可見分光光度計、紫外可見分光光度計、原子吸收光譜儀、原子熒光光度計、ICP-AES、ICP-MS，生命科學(xué)儀器：超微量分光光度計、全自動核酸提取儀，目前，我們的產(chǎn)品已廣泛應(yīng)用于有機(jī)化學(xué)、無機(jī)化學(xué)、生物化學(xué)、醫(yī)藥、環(huán)保、冶金、石油、農(nóng)業(yè)等領(lǐng)域。同時美析利用在產(chǎn)品機(jī)械結(jié)構(gòu)、光學(xué)設(shè)計、電氣應(yīng)用和軟件開發(fā)方面積累的豐富經(jīng)驗，結(jié)合市場的最xin實際需求，近期將陸續(xù)推出一批全新的分析類儀器。
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