微射流均質(zhì)機(jī)在 MF59/AS03 疫苗佐劑制備中的應(yīng)用

實(shí)驗(yàn)背景

疫苗佐劑又稱為免疫調(diào)節(jié)劑或免疫增強(qiáng)劑，是疫苗的一種添加劑，用于增強(qiáng)或改變動(dòng)物體對特定抗原的免疫應(yīng)答。

當(dāng)佐劑先于抗原或與抗原混合注入機(jī)體后，能夠增強(qiáng)對抗原的免疫應(yīng)答或者改變免疫反應(yīng)的類型。佐劑不僅能夠增強(qiáng)免疫反應(yīng)，而且能使機(jī)體獲得最佳的保護(hù)性免疫。

目前獲批上市的疫苗用佐劑數(shù)量仍較少，除應(yīng)用百年的鋁鹽佐劑外，獲批上市的新型佐劑僅 MF59、AS03、AS04、AS01、CpG1018 及 Matrix-M 六種，大部分應(yīng)用在流感疫苗、HPV 疫苗、乙肝疫苗、帶狀皰疹疫苗。其中 MF59、AS03 是水包油乳劑型疫苗佐劑。

MF59

由諾華公司開發(fā)，是被批準(zhǔn)用于人類疫苗的水包油乳劑型佐劑，顯著增強(qiáng)了季節(jié)性和大流行流感疫苗的免疫原性，尤其是對老年人。MF59 以角鯊烯（體積分?jǐn)?shù) 4.5%~5.0%）為油相，兩種非離子表面活性劑聚山梨酯 80 （Tween 80）（質(zhì)量體積分?jǐn)?shù) 0.47%）和三油酸山梨坦（Span 85）（質(zhì)量體積分?jǐn)?shù) 0.47%）為乳化劑分散于檸檬酸鹽緩沖液中形成的水包油乳劑型佐劑，顆粒直徑約為 160nm，已廣泛應(yīng)用于流感、乙肝、結(jié)核病、疤疹病毒疫苗及腫瘤疫苗的制備

AS03

由葛蘭素史克開發(fā)，分別用于瘧疾疫苗 RTS,S 和 H1N1 流感疫苗，展示了免疫增強(qiáng)效果和良好的安全性。AS03 是以 DL-α-生育酚（質(zhì)量體積分?jǐn)?shù) 4.7%）、角鯊烯（質(zhì)量體積分?jǐn)?shù) 4.3%）為油相，非離子表面活性劑 Tween 80（質(zhì)量體積分?jǐn)?shù) 1.94%）為乳化劑分散于 PBS 中形成的水包油乳劑型佐劑。

實(shí)驗(yàn)對象

MF59；AS03

實(shí)驗(yàn)儀器

高速剪切機(jī)

Nano 型微射流均質(zhì)機(jī)

Mini 型微射流均質(zhì)機(jī)

冷水機(jī)

實(shí)驗(yàn)重點(diǎn)

配方中原料的來源與批間差異、初乳制備工藝、微射流均質(zhì)壓力及均質(zhì)過程溫度的控制、核心均質(zhì)腔體的選擇

實(shí)驗(yàn)過程

初乳制備

高剪切 10000rpm 均質(zhì) 15min

微射流均質(zhì)制備

使用微射流均質(zhì)機(jī)，控溫 15℃，15000psi、20000psi、28000psi 均質(zhì)后取樣測試。

粒徑結(jié)果

檢測圖譜

佐劑類型	均質(zhì)壓力/psi	粒徑圖譜
MF59	初乳
	15000
	20000
	28000
AS03	初乳
	20000

實(shí)驗(yàn)結(jié)果

使用 Nano 型、Mini 型微射流均質(zhì)機(jī)可實(shí)現(xiàn) MF59/AS03 等水包油乳劑型疫苗佐劑的納米化制備。