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牙刷是電動(dòng)好!那石蠟切片機(jī)呢?
閱讀:2144 發(fā)布時(shí)間:2022-5-19Leica有多種型號(hào)的石蠟切片機(jī)。常規(guī)石蠟切片有手動(dòng)、半自動(dòng)和電動(dòng)之分。價(jià)格也成梯度。
目前,國內(nèi)外大多數(shù)的科研工作者都以切片機(jī)預(yù)設(shè)的切片厚度值作為組織切片真實(shí)厚度的默認(rèn)值,很少有人探究組織切片厚度的變化可能會(huì)對(duì)觀察和評(píng)測結(jié)果造成多大影響。
實(shí)際中,同一組織樣本不同厚度的切片在顯微鏡下觀察時(shí),薄組織切片的顏色往往淡于厚切片,如果以鏡下觀察的顏色深淺來定性判斷被檢測化學(xué)物質(zhì) (包括抗原或抗體)的有無,則可能因?yàn)榻M織切片較薄而被認(rèn)為是陰性的結(jié)果。
同時(shí),組織切片較薄、顏色太淺不但對(duì)組織細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)和化學(xué)物質(zhì)的定位觀察產(chǎn)生影響,而且更會(huì)因?yàn)榍衅穸鹊牟缓愣?,可極大地動(dòng)搖定量分析結(jié)果的可靠性。
即使在恒定切片機(jī)厚度刻度值的條件下手動(dòng)切片,同一組織切片內(nèi)及相鄰的組織切片之間也常會(huì)出現(xiàn)肉眼可見的表現(xiàn)為顏色深淺不一的厚度差異。
切片厚度受制片過程中多種因素的影響,例如:切片刀的鋒利程度、切片時(shí)的環(huán)境溫度、切片的速度、石蠟的熔點(diǎn)和硬度及韌性等。
下面就手動(dòng)和自動(dòng)兩種切片的厚度差異在這里做個(gè)介紹,這種差異的結(jié)果是經(jīng)采用二次包埋法進(jìn)行重切片,用圖像分析儀測量組織切片的實(shí)測厚度,觀察組織切片實(shí)測厚度的變化而得出的,其可為組織、細(xì)胞的形態(tài)結(jié)構(gòu)和化學(xué)物質(zhì)的定性與定位觀察及定量分析結(jié)果的評(píng)價(jià)提供參考。
分析結(jié)果顯示:手動(dòng)和自動(dòng)切片對(duì)組織切片的實(shí)測厚度有顯著性差異 (p<0.05)組織種類對(duì)組織切片的實(shí)測厚度無顯著性差異 p="">0.05)。
各組織切片的厚度測量均值均較切片機(jī)預(yù)設(shè)厚度值大,同一切片機(jī)預(yù)設(shè)厚度值條件下,自動(dòng)切片的實(shí)測厚度均值均小于手動(dòng)切片,且更接近切片機(jī)預(yù)設(shè)刻度值。
相同組織的組織切片實(shí)測厚度的 ji 端離散趨勢 (ji差)隨切片機(jī)預(yù)設(shè)厚度值的增加而呈現(xiàn)上升趨勢,且手動(dòng)切片組的極差大于自動(dòng)切片組,但兩組之間的極差比較尚沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
盡管石蠟包埋組織切片的制備方法已得到不斷的改良定型,但是,切片機(jī)預(yù)設(shè)的切片厚度值與組織切片的實(shí)測厚度值間的差異情況仍不能為人們所忽視,它對(duì)評(píng)判組織細(xì)胞結(jié)構(gòu)的形態(tài)和化學(xué)物質(zhì) (包括抗原或抗體)有無和多少將產(chǎn)生影響,應(yīng)引起高度的重視。
切片機(jī)預(yù)設(shè)的切片厚度刻度值與組織切片的實(shí)測厚度值之間有10%以上的差異,切片機(jī)標(biāo)示厚度與實(shí)測厚度間的平均誤差為17.2%。
實(shí)驗(yàn)獲得的組織切片厚度變化的研究結(jié)果表明切片機(jī)的切片厚度預(yù)設(shè)值低估了石蠟包埋組織切片的真實(shí)厚度,實(shí)驗(yàn)切片機(jī)預(yù)設(shè)切片厚度與手動(dòng)和自動(dòng)切片厚度相差較大。
其主要原因是由于切片機(jī)作自動(dòng)切片時(shí)其切片的速度恒定,石蠟包埋的組織受力均勻,而手動(dòng)切片時(shí)的切片速度難以恒定,致使石蠟包埋的組織受力不均勻,切片機(jī)的使用年限越久,活動(dòng)機(jī)械連接的間隙越大,產(chǎn)生實(shí)際切片的厚度大于或小于切片機(jī)預(yù)設(shè)切片厚度的機(jī)會(huì)越大。
如使用的切片機(jī)為全新的,則實(shí)測切片厚度均大于而不小于切片機(jī)預(yù)設(shè)切片厚度,而使用年久的手動(dòng)切片機(jī),其實(shí)測切片的厚度有不少小于切片機(jī)預(yù)設(shè)切片厚度,這與上述分析相吻合的。
實(shí)際操作表明全自動(dòng)切片機(jī)的切片速度快慢的設(shè)置與切片機(jī)輪轉(zhuǎn)速度有關(guān),但對(duì)石蠟包埋組織蠟塊切片瞬間的速度并未產(chǎn)生明顯影響。
手動(dòng)切片的速度是以操作者個(gè)人主觀感覺來控制的,難以保證恒定的切片速度,其組織切片間厚度的差異更大,這與實(shí)驗(yàn)結(jié)果的極差是相符的。
通過觀察組織切片厚度的變化,發(fā)現(xiàn)不同切片方法對(duì)組織切片真實(shí)厚度有影響,自動(dòng)切片的組織薄片的實(shí)測厚度與預(yù)設(shè)厚度刻度值的差異小于手動(dòng)切片,自動(dòng)切片獲得的組織切片的精度更高,優(yōu)于手動(dòng)切片。
因此,石蠟切片機(jī)的手動(dòng)、半自動(dòng)和自動(dòng)切片機(jī)究竟該怎么選呢?
只要條件允許,盡量選擇一款全電動(dòng)切片機(jī)!
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