液相色譜(High Performance Liquid Chromatography，HPLC)，是在經(jīng)典液相色譜法的基礎(chǔ)上，于20世紀(jì)60年代后期引入了氣相色譜理論而迅速發(fā)展起來的。與經(jīng)典液相色譜法的區(qū)別是填料顆粒小而均勻。因?yàn)檩^小的填充顆粒具有高柱效，但會引起高阻力，需用高壓輸送流動相，故又稱高壓液相色譜。
使用液相色譜時，液體待檢測物被注入色譜柱，通過壓力在固定相中移動，由于被測物種不同物質(zhì)與固定相的相互作用不同，不同的物質(zhì)順序離開色譜柱，通過檢測器得到不同的峰信號，后通過分析比對這些信號來判斷待測物所含有的物質(zhì)。液相色譜作為一種重要的分析方法，廣泛地應(yīng)用于化學(xué)和生化分析中。液相色譜從原理上與經(jīng)典的液相色譜沒有本質(zhì)的差別，它的特點(diǎn)是采用了高壓輸液泵、高靈敏度檢測器和微粒固定相，適于分析高沸點(diǎn)不易揮發(fā)、分子量大、不同極性的有機(jī)化合物。
液相色譜儀的構(gòu)造
液相色譜系統(tǒng)主要由流動相儲液瓶、輸液泵、進(jìn)樣器、色譜柱、檢測器和記錄儀組成，其整體組成類似于氣相色譜，但是針對其流動相為液體的特點(diǎn)作出很多調(diào)整。液相色譜的輸液泵要求輸液量恒定平穩(wěn)，進(jìn)樣系統(tǒng)要求進(jìn)樣便利、切換嚴(yán)密。同時，由于液體流動相黏度遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于氣體，為了減低柱壓，液相色譜的色譜柱一般比較粗，長度也遠(yuǎn)小于氣相色譜柱。圖3所示為液相色譜儀的結(jié)構(gòu)示意圖。
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