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液相色譜儀操作步驟

時間:2019/9/11閱讀:3207
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  液相色譜是一類分離與分析技術(shù),其特點是以液體作為流動相,固定相可以有多種形式,如紙、薄板和填充床等。在色譜技術(shù)發(fā)展的過程中.為了區(qū)分各種方法,根據(jù)固定相的形式產(chǎn)生了各自的命名,如紙色譜、薄層色譜和柱液相色譜。
 
  液相色譜儀操作步驟:
 
  1)過濾流動相,根據(jù)需要選擇不同的濾膜。
 
  2)對抽濾后的流動相進行超聲脫氣10-20分鐘。
 
  3)打開HPLC工作站(包括計算機軟件和色譜儀),連接好流動相管道,鏈接監(jiān)測系統(tǒng)。
 
  4)進入HPLC控制界面主菜單,點擊manual,進入手動菜單。
 
  5)有一段時間沒用,或者換了新的流動相,需要先沖洗泵和進樣閥。沖洗泵,直接泵的出水口,用針頭抽取。沖洗進樣閥,需要在manual菜單下,先點擊purge,再點擊start,沖洗時速度不要超過10ml/min
 
  6)調(diào)節(jié)流量,初次使用新的流動相,可以先試一下壓力,流速越大,壓力越大,一般不要超過2000.點擊injure,選用合適的流速,點擊on,走基線,觀察基線的情況。
 
  7)設(shè)計走樣方法。點擊file。選取select users and methods,可以選取現(xiàn)有的各種走樣方法。若需建立一個新的方法,點擊 new method。選取需要的配件,包括進樣閥,泵,檢測器等,根據(jù)需要而不同。選完后,點擊protocol。一個完整的走樣方法需要包括:a.進樣前的穩(wěn)流,一般2-5分鐘; b.基線歸零; c.進樣閥的loading-inject轉(zhuǎn)換; d.走樣時間,隨不同樣品而不同。
 
  8)進樣和進樣后操作。選定走樣方法,點擊start。進樣,所有的樣品均需過濾。方法走完后,點擊postrun,可記錄數(shù)據(jù)和做標(biāo)記等。全部樣品走完后,再用上面的方法走一段基線,洗掉剩余物。
 
  9)關(guān)機時,先關(guān)計算機,再關(guān)液相色譜。
 
  10)填寫登記本,由負責(zé)人簽字。

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